Εισαγωγή στις βασικές αρχές της μικροσκοπίας αντίθεσης φάσης
Το μικροσκόπιο αντίθεσης φάσης είναι ένα ειδικό μικροσκόπιο που μετατρέπει τη διαφορά οπτικής διαδρομής (δηλαδή, διαφορά φάσης) που δημιουργείται όταν το φως διέρχεται από λεπτομέρειες ενός διαφανούς δείγματος σε διαφορά έντασης φωτός.
Όταν το φως διέρχεται από ένα σχετικά διαφανές δείγμα, δεν υπάρχει εμφανής αλλαγή στο μήκος κύματος (χρώμα) και το πλάτος (φωτεινότητα) του φωτός. Επομένως, κατά την παρατήρηση μη χρωματισμένων δειγμάτων (όπως ζωντανά κύτταρα) με ένα συνηθισμένο οπτικό μικροσκόπιο, η μορφολογία και η εσωτερική δομή του είναι συχνά δύσκολο να διακριθούν. Ωστόσο, λόγω των διαφορών στον δείκτη διάθλασης και στο πάχος των διαφόρων τμημάτων της κυψέλης, όταν το φως διέρχεται από αυτό το δείγμα, τα μήκη οπτικής διαδρομής του άμεσου φωτός και του φωτός με διάθλαση θα είναι διαφορετικά. Καθώς το μήκος της οπτικής διαδρομής αυξάνεται ή μειώνεται, η φάση των κυμάτων φωτός που επιταχύνονται ή υστερούν αλλάζει (δημιουργεί διαφορά φάσης). Η διαφορά φάσης του φωτός δεν μπορεί να γίνει αισθητή με γυμνό μάτι, αλλά το μικροσκόπιο αντίθεσης φάσης μπορεί να χρησιμοποιήσει την ειδική συσκευή του - το δακτυλιοειδές διάφραγμα και την πλάκα φάσης για να χρησιμοποιήσει το φαινόμενο παρεμβολής του φωτός για να μετατρέψει τη διαφορά φάσης του φωτός σε διαφορά πλάτους (φως και σκούρο) που μπορεί να ανιχνευθεί από το ανθρώπινο μάτι. διαφορά), έτσι ώστε το αρχικό διαφανές αντικείμενο να δείχνει εμφανείς διαφορές στο φως και το σκοτάδι και η αντίθεση να ενισχύεται, επιτρέποντάς μας να παρατηρήσουμε πιο καθαρά ζωντανά κύτταρα και ενδοκυτταρικά συστατικά που δεν μπορούν να φανούν ή δεν μπορούν να φανούν καθαρά κάτω από συνηθισμένα οπτικά μικροσκόπια και σκοτεινό πεδίο μικροσκόπια. ορισμένες μικροδομές.
Η αρχή απεικόνισης του μικροσκοπίου αντίθεσης φάσης: Η πηγή φωτός για μικροσκοπική εξέταση μπορεί να περάσει μόνο μέσω του διαφανούς δακτυλίου του δακτυλιοειδούς διαφράγματος και στη συνέχεια να συμπυκνωθεί σε μια δέσμη φωτός από τον συμπυκνωτή. Όταν αυτή η δέσμη φωτός διέρχεται από το αντικείμενο που πρόκειται να επιθεωρηθεί, το φως θα είναι διαφορετικό λόγω των διαφορετικών μηκών οπτικής διαδρομής κάθε τμήματος. βαθμός απόκλισης (διάθλασης). Επειδή η εικόνα που σχηματίζεται από τον διαφανή δακτύλιο συμβαίνει να συμπίπτει με το πίσω εστιακό επίπεδο του αντικειμενικού φακού και το συζυγές επίπεδο στην πλάκα φάσης. Επομένως, το μη εκτρεπόμενο άμεσο φως διέρχεται από τη συζευγμένη επιφάνεια, ενώ το εκτρεπόμενο διαθλασμένο φως διέρχεται από την επιφάνεια αντιστάθμισης. Λόγω των διαφορετικών ιδιοτήτων της συζυγούς επιφάνειας και της επιφάνειας αντιστάθμισης στην πλάκα φάσης, θα παράγουν μια ορισμένη διαφορά φάσης και εξασθένηση της έντασης στο φως που διέρχεται από αυτά τα δύο μέρη αντίστοιχα. Στη συνέχεια, τα δύο σετ φωτός συγκλίνονται από τον πίσω φακό και επιστρέφουν στην ίδια οπτική διαδρομή. Ταξιδεύοντας, το άμεσο φως και το περιθλαμένο φως θα παρεμβαίνουν μεταξύ τους, αλλάζοντας τη διαφορά φάσης σε διαφορά πλάτους. Με αυτόν τον τρόπο, κατά τη μικροσκοπία αντίθεσης φάσης, το φως που διέρχεται από το άχρωμο διαφανές σώμα μετατρέπει τη διαφορά φάσης που δεν διακρίνεται από το ανθρώπινο μάτι σε μια διαφορά πλάτους (διαφορά μεταξύ φωτός και σκότους) που μπορεί να διακρίνει το ανθρώπινο μάτι.
