Υπάρχουν δύο τύποι μικροσκοπίων φθορισμού με βάση την οπτική τους διαδρομή:
1. Μικροσκόπιο φθορισμού μετάδοσης: Η πηγή φωτός διέγερσης μεταδίδεται μέσω του υλικού του δείγματος μέσω ενός συμπυκνωτή για να διεγείρει τον φθορισμό. Οι κοινώς χρησιμοποιούμενοι συλλέκτες φωτός σκοτεινού πεδίου ή οι συνηθισμένοι συλλέκτες φωτός, μπορούν να χρησιμοποιηθούν για τη ρύθμιση του ανακλαστήρα για τη μετατροπή του φωτός διέγερσης και του πλευρικού φωτός στο δείγμα. Αυτό είναι ένα σχετικά παλιομοδίτικο μικροσκόπιο φθορισμού. Το πλεονέκτημά του είναι ότι ο φθορισμός είναι ισχυρός σε χαμηλή μεγέθυνση, ενώ το μειονέκτημά του είναι ότι ο φθορισμός εξασθενεί όσο αυξάνεται η μεγέθυνση. Επομένως, είναι καλύτερο για την παρατήρηση μεγαλύτερων υλικών δειγμάτων.
2. Μικροσκόπιο φθορισμού δέσμης πτώσης Αυτός είναι ένας νέος τύπος μικροσκοπίου φθορισμού που αναπτύχθηκε στη σύγχρονη εποχή. Σε αντίθεση με το προηγούμενο, το φως διέγερσης πέφτει από τον αντικειμενικό φακό στην επιφάνεια του δείγματος, χρησιμοποιώντας τον ίδιο αντικειμενικό φακό με τον συμπυκνωτή φωτισμού και τον αντικειμενικό φακό για τη συλλογή του φθορισμού. Πρέπει να προστεθεί ένας διαχωριστής δέσμης διπλού χρώματος στην οπτική διαδρομή, η οποία βρίσκεται σε γωνία 45 μοιρών ως προς το ελαφρύ ουράνιο. Το φως διέγερσης ανακλάται στον αντικειμενικό φακό και συγκεντρώνεται στο δείγμα. Ο φθορισμός που δημιουργείται από το δείγμα, καθώς και το φως διέγερσης που ανακλάται από την επιφάνεια του αντικειμενικού φακού και του γυαλιού καλύμματος, εισέρχονται στον αντικειμενικό φακό ταυτόχρονα και επιστρέφουν στον διαχωριστή διχρωμίας δέσμης, διαχωρίζοντας τη διέγερση και τον φθορισμό. Η υπολειπόμενη διέγερση στη συνέχεια απορροφάται από το φίλτρο μπλοκαρίσματος. Εάν χρησιμοποιούνται διαφορετικά φίλτρα διέγερσης/διαχωριστές δέσμης διπλού χρώματος/ συνδυασμοί φίλτρων αποκλεισμού, μπορούν να καλύψουν τις ανάγκες διαφορετικών προϊόντων αντίδρασης φθορισμού. Το πλεονέκτημα αυτού του μικροσκοπίου φθορισμού είναι ότι το οπτικό πεδίο φωτισμού είναι ομοιόμορφο, η απεικόνιση είναι καθαρή και όσο μεγαλύτερη είναι η μεγέθυνση, τόσο ισχυρότερος είναι ο φθορισμός.
(2) Χρήση μικροσκοπίου φθορισμού
1. Ενεργοποιήστε την πηγή φωτός και η λυχνία υδραργύρου εξαιρετικά υψηλής πίεσης πρέπει να προθερμανθεί για λίγα λεπτά για να φτάσει στο αποκορύφωμά της.
2. Το μικροσκόπιο φθορισμού μετάδοσης απαιτεί να εγκατασταθεί το απαιτούμενο φίλτρο διέγερσης μεταξύ της πηγής της λυχνίας και του συμπυκνωτή και το αντίστοιχο φίλτρο μπλοκαρίσματος να εγκατασταθεί πίσω από τον αντικειμενικό φακό. Το μικροσκόπιο φθορισμού δέσμης πτώσης πρέπει να εισάγει το απαιτούμενο φίλτρο διέγερσης/διαχωριστή διπλής δέσμης χρώματος/μπλοκ φίλτρου μπλοκαρίσματος στην υποδοχή της οπτικής διαδρομής.
3. Παρατηρήστε με μικροσκόπιο χαμηλής ισχύος και ρυθμίστε το κέντρο της πηγής φωτός σύμφωνα με τις συσκευές ρύθμισης διαφορετικών μοντέλων μικροσκοπίων φθορισμού, έτσι ώστε να βρίσκεται στο κέντρο ολόκληρου του σημείου φωτισμού.
4. Τοποθετήστε τις φέτες του δείγματος και εστιάστε τις για να τις παρατηρήσετε. Κατά τη χρήση, πρέπει να σημειωθεί ότι το τελικό φίλτρο δεν πρέπει να παρατηρείται απευθείας με τα μάτια για να αποφευχθεί η βλάβη των ματιών. Κατά την παρατήρηση δειγμάτων με μικροσκόπιο λαδιού, πρέπει να χρησιμοποιείται ειδικό μικροσκόπιο μη φθορίζοντος λαδιού. Αφού σβήσει η λυχνία υδραργύρου υψηλής πίεσης, δεν μπορεί να ανάψει ξανά αμέσως. Χρειάζονται 5 λεπτά για να ξεκινήσει ξανά, διαφορετικά θα είναι ασταθές και θα επηρεάσει τη διάρκεια ζωής της λάμπας υδραργύρου.
(3) Παρατηρώντας κάτω από ένα μικροσκόπιο φθορισμού στην πλατφόρμα διδασκαλίας χρησιμοποιώντας ένα φίλτρο μπλε πορφυρού φωτός, μπορεί να φανεί ότι κύτταρα βαμμένα με φθορίζουσα χρωστική πορτοκαλί ακριδίνης 01%, ο πυρήνας και το κυτταρόπλασμα διεγείρονται για να παράγουν δύο διαφορετικά χρώματα φθορισμού (σκούρο πράσινο και πορτοκαλί κόκκινο).
