Υπάρχουν δύο τύποι μικροσκοπίων φθορισμού με βάση τις διαδρομές φωτός τους.
1. Μικροσκόπιο φθορισμού μετάδοσης: Η πηγή φωτός διέγερσης περνά μέσα από το υλικό του δείγματος μέσω ενός συμπυκνωτή για να διεγείρει τον φθορισμό. Συνήθως χρησιμοποιείται ένας συλλέκτης σκοτεινού πεδίου ή μπορεί να χρησιμοποιηθεί ένας συνηθισμένος συλλέκτης και ο ανακλαστήρας ρυθμίζεται ώστε να εκτρέπει και να ακτινοβολεί πλευρικά το φως διέγερσης στο δείγμα. Αυτό είναι ένα παλαιότερο μικροσκόπιο φθορισμού. Το πλεονέκτημα είναι ότι ο φθορισμός είναι ισχυρός σε χαμηλή μεγέθυνση, αλλά το μειονέκτημα είναι ότι ο φθορισμός εξασθενεί καθώς αυξάνεται η μεγέθυνση. Επομένως, είναι καλύτερο να παρατηρήσετε μεγαλύτερα δείγματα υλικών.
2. Το μικροσκόπιο Epi-fluorescence είναι ένας νέος τύπος μικροσκοπίου φθορισμού που αναπτύχθηκε στη σύγχρονη εποχή. Η διαφορά από τα παραπάνω είναι ότι το φως διέγερσης πέφτει προς τα κάτω από τον αντικειμενικό φακό στην επιφάνεια του δείγματος, δηλαδή, ο ίδιος αντικειμενικός φακός χρησιμοποιείται με τον συμπυκνωτή φωτισμού και τον αντικειμενικό φακό για τη συλλογή του φθορισμού. Πρέπει να προστεθεί ένας διαχωριστής δέσμης δύο χρωμάτων στην οπτική διαδρομή, που είναι 45% με το οπτικό ουράνιο. Γωνία, το φως διέγερσης αντανακλάται στον αντικειμενικό φακό και συγκεντρώνεται στο δείγμα. Ο φθορισμός που δημιουργείται από το δείγμα και το φως διέγερσης που ανακλάται από την επιφάνεια του αντικειμενικού φακού και την επιφάνεια του γυαλιού καλύμματος εισέρχονται στον αντικειμενικό φακό ταυτόχρονα και επιστρέφουν στον διχρωματικό διαχωριστή δέσμης, έτσι ώστε το φως διέγερσης Διαχωρίζεται από τον φθορισμό, η υπολειπόμενη διέγερση Το φως στη συνέχεια απορροφάται από το φίλτρο μπλοκαρίσματος. Εάν χρησιμοποιείτε διαφορετικά ένθετα συνδυασμού φίλτρου διέγερσης/διχρωματιστή δέσμης/μπλοκαρίσματος φίλτρου, μπορείτε να καλύψετε τις ανάγκες διαφορετικών προϊόντων αντίδρασης φθορισμού. Το πλεονέκτημα αυτού του είδους μικροσκοπίου φθορισμού είναι ότι το οπτικό πεδίο είναι ομοιόμορφα φωτισμένο, η εικόνα είναι καθαρή και όσο μεγαλύτερη είναι η μεγέθυνση, τόσο ισχυρότερος είναι ο φθορισμός.
(2) Πώς να χρησιμοποιήσετε το μικροσκόπιο φθορισμού.
1. Ενεργοποιήστε την πηγή φωτός και η λυχνία υδραργύρου υπερυψηλής πίεσης πρέπει να ζεσταθεί για αρκετά λεπτά για να φτάσει στο πιο φωτεινό της σημείο.
2. Τα μικροσκόπια φθορισμού μετάδοσης απαιτούν την εγκατάσταση του απαιτούμενου φίλτρου διέγερσης μεταξύ της φωτεινής πηγής και του συμπυκνωτή και το αντίστοιχο φίλτρο μπλοκαρίσματος πίσω από τον αντικειμενικό φακό. Τα μικροσκόπια επιφθορισμού πρέπει να εισάγουν το απαιτούμενο φίλτρο διέγερσης/διχρωματικό διαχωριστή δέσμης/φίλτρο αποκλεισμού στην υποδοχή της φωτεινής διαδρομής.
3. Χρησιμοποιήστε ένα μικροσκόπιο χαμηλής μεγέθυνσης για να παρατηρήσετε και ρυθμίστε το κέντρο της πηγής φωτός σύμφωνα με τις συσκευές ρύθμισης διαφορετικών μοντέλων μικροσκοπίων φθορισμού, έτσι ώστε να βρίσκεται στο κέντρο ολόκληρου του σημείου φωτισμού.
4. Τοποθετήστε το τεμάχιο δείγματος και προσαρμόστε την εστίαση για παρατήρηση. Προσέξτε κατά τη χρήση: Μην παρατηρείτε το φίλτρο απευθείας με τα μάτια σας για να αποφύγετε βλάβη στα μάτια. κατά την παρατήρηση του δείγματος με φακό λαδιού, πρέπει να χρησιμοποιήσετε έναν ειδικό μη φθορίζοντα φακό λαδιού. η λυχνία υδραργύρου υψηλής πίεσης δεν μπορεί να ανοίξει ξανά αμέσως μετά την απενεργοποίησή της. Μπορεί να ξεκινήσει ξανά μετά από 5 λεπτά, διαφορετικά θα είναι ασταθές και θα επηρεάσει τη διάρκεια ζωής της λάμπας υδραργύρου.
(3) Παρατηρήστε κάτω από το μικροσκόπιο φθορισμού στην πλατφόρμα διδασκαλίας χρησιμοποιώντας ένα φίλτρο μπλε-ιώδους φωτός. Φαίνεται ότι το απόσπασμα είναι ο. Σε κύτταρα που έχουν χρωματιστεί με φθορίζουσα χρωστική πορτοκαλί ακριδίνης 01%, ο πυρήνας και το κυτταρόπλασμα διεγείρονται για να παράγουν δύο διαφορετικά χρώματα φθορισμού (σκούρο πράσινο και πορτοκαλοκόκκινο).
