Ποια είναι η διαφορά μεταξύ της ομοεστιακής μικροσκοπίας φθορισμού και λέιζερ;
μικροσκόπιο φθορισμού
1. Το μικροσκόπιο φθορισμού είναι μια συσκευή που χρησιμοποιεί το υπεριώδες φως ως πηγή φωτός για να φωτίσει το αντικείμενο που εξετάζεται, προκαλώντας το να εκπέμπει φθορισμό και, στη συνέχεια, να παρατηρήσει το σχήμα και τη θέση του αντικειμένου κάτω από το μικροσκόπιο. Το μικροσκόπιο φθορισμού χρησιμοποιείται για τη μελέτη της απορρόφησης, μεταφοράς, κατανομής και εντοπισμού ουσιών μέσα στα κύτταρα. Ορισμένες ουσίες στα κύτταρα, όπως η χλωροφύλλη, μπορούν να εκπέμπουν φθορισμό μετά την έκθεση τους στην υπεριώδη ακτινοβολία. Ορισμένες ουσίες από μόνες τους μπορεί να μην εκπέμπουν φθορισμό, αλλά εάν χρωματιστούν με φθορίζουσες βαφές ή φθορίζοντα αντισώματα, μπορούν επίσης να εκπέμπουν φθορισμό υπό υπεριώδη ακτινοβολία. Η μικροσκοπία φθορισμού είναι ένα από τα εργαλεία για ποιοτική και ποσοτική έρευνα για αυτές τις ουσίες.
2. Αρχή του μικροσκοπίου φθορισμού:
(Α) Πηγή φωτός: Η φωτεινή πηγή εκπέμπει φως διαφόρων μηκών κύματος (από υπεριώδες έως υπέρυθρο).
(Β) Πηγή φωτός φίλτρου διέγερσης: Εκπέμπει φως συγκεκριμένου μήκους κύματος που μπορεί να παράγει φθορισμό στο δείγμα, ενώ εμποδίζει το φως που είναι άχρηστο για φθορισμό διέγερσης.
(Γ) Δείγματα φθορισμού: γενικά χρωματίζονται με φθορίζουσες χρωστικές.
(Δ) Φίλτρο αποκλεισμού: εκπέμπει επιλεκτικά τον φθορισμό εμποδίζοντας το φως διέγερσης που δεν έχει απορροφηθεί από το δείγμα και ορισμένα μήκη κύματος μεταδίδονται επίσης επιλεκτικά στον φθορισμό. Ένα μικροσκόπιο που χρησιμοποιεί το υπεριώδες φως ως πηγή φωτός για να εκπέμπει φθορισμό από το ακτινοβολημένο αντικείμενο. Το ηλεκτρονικό μικροσκόπιο συναρμολογήθηκε για πρώτη φορά από τους Knorr και Harroska στο Βερολίνο της Γερμανίας το 1931. Αυτός ο τύπος μικροσκοπίου χρησιμοποιεί μια δέσμη ηλεκτρονίων υψηλής ταχύτητας αντί για μια δέσμη φωτός. Λόγω του πολύ μικρότερου μήκους κύματος της ροής των ηλεκτρονίων σε σύγκριση με τα κύματα φωτός, η μεγέθυνση του ηλεκτρονικού μικροσκοπίου μπορεί να φτάσει τις 8 00000 φορές, με ελάχιστο όριο ανάλυσης τα 0,2 νανόμετρα. Το ηλεκτρονικό μικροσκόπιο σάρωσης, το οποίο άρχισε να χρησιμοποιείται το 1963, επιτρέπει στους ανθρώπους να δουν τις μικροσκοπικές δομές στην επιφάνεια των αντικειμένων.
3. Πεδίο εφαρμογής: Χρησιμοποιείται για μεγέθυνση εικόνων μικρών αντικειμένων. Χρησιμοποιείται γενικά για παρατήρηση βιολογίας, ιατρικής, μικροσκοπικών σωματιδίων κ.λπ.
ομοεστιακό μικροσκόπιο
1. Ένα ομοεστιακό μικροσκόπιο προσθέτει έναν ημιανακλαστικό φακό στη διαδρομή ανακλώμενου φωτός, ο οποίος κάμπτει το ανακλώμενο φως που έχει ήδη περάσει μέσα από τον φακό προς άλλες κατευθύνσεις. Υπάρχει ένα διάφραγμα με μια τρύπα καρφίτσας στο εστιακό του σημείο και η μικρή τρύπα βρίσκεται στο εστιακό σημείο. Πίσω από το διάφραγμα υπάρχει ένας σωλήνας φωτοπολλαπλασιαστή. Μπορεί να φανταστεί κανείς ότι το ανακλώμενο φως πριν και μετά το εστιακό σημείο του φωτός ανίχνευσης δεν μπορεί να εστιαστεί στη μικρή οπή μέσω αυτού του ομοεστιακού συστήματος και θα μπλοκαριστεί από το διάφραγμα. Έτσι το φωτόμετρο μετρά την ένταση του ανακλώμενου φωτός στο εστιακό σημείο.
2. Αρχή: Τα παραδοσιακά οπτικά μικροσκόπια χρησιμοποιούν πηγές φωτός πεδίου και η εικόνα κάθε σημείου του δείγματος θα επηρεαστεί από τη διάθλαση ή το σκεδαζόμενο φως από γειτονικά σημεία. Το ομοεστιακό μικροσκόπιο σάρωσης λέιζερ χρησιμοποιεί μια δέσμη λέιζερ για να σχηματίσει μια σημειακή πηγή φωτός μέσω μιας φωτιζόμενης οπής για να σαρώσει κάθε σημείο στο εστιακό επίπεδο του δείγματος. Το φωτισμένο σημείο στο δείγμα απεικονίζεται στην οπή ανίχνευσης και λαμβάνεται σημείο προς σημείο ή γραμμή από έναν σωλήνα φωτοπολλαπλασιαστή (PMT) ή μια συσκευή θερμοηλεκτρικής ζεύξης (cCCD) μετά την οπή ανίχνευσης, σχηματίζοντας γρήγορα μια φθορίζουσα εικόνα στην οθόνη του υπολογιστή οθόνη. Η οπή φωτισμού και η οπή ανίχνευσης είναι συζευγμένες σε σχέση με το εστιακό επίπεδο του αντικειμενικού φακού. Τα σημεία στο εστιακό επίπεδο εστιάζονται ταυτόχρονα στην οπή καρφίτσας φωτισμού και στην οπή εκπομπής και τα σημεία έξω από το εστιακό επίπεδο δεν θα απεικονίζονται στην οπή ανίχνευσης. Αυτό έχει ως αποτέλεσμα μια ομοεστιακή εικόνα που αντιπροσωπεύει την οπτική διατομή του δείγματος, ξεπερνώντας το μειονέκτημα των θολών εικόνων στη συμβατική μικροσκοπία.
3. Τομείς εφαρμογής: που περιλαμβάνει ιατρική, έρευνα ζώων και φυτών, βιοχημεία, βακτηριολογία, κυτταρική βιολογία, ιστούς και έμβρυα, επιστήμη τροφίμων, γενετική, φαρμακολογία, φυσιολογία, οπτική, παθολογία, βοτανική, νευροεπιστήμη, θαλάσσια βιολογία, επιστήμη υλικών, ηλεκτρονική επιστήμη, μηχανική, γεωλογία πετρελαίου και ορυκτολογία.
