Μέθοδος ανίχνευσης μικροσκοπίας φθορισμού
μικροσκόπιο φθορισμού
Η μικροσκοπία φθορισμού είναι ένα θεμελιώδες εργαλείο για την κυτταροχημεία του ανοσοφθορισμού. Αποτελείται από κύρια εξαρτήματα όπως πηγή φωτός, σύστημα πλάκας φίλτρου και οπτικό σύστημα. Χρησιμοποιεί ένα ορισμένο μήκος κύματος φωτός για να διεγείρει το δείγμα και να εκπέμπει φθορισμό, ο οποίος μεγεθύνεται μέσω ενός αντικειμενικού συστήματος και ενός συστήματος προσοφθάλμιου φακού για την παρατήρηση της εικόνας φθορισμού του δείγματος (Εικόνα 1).
(1) Πηγή φωτός
Σήμερα, ένας λαμπτήρας υδραργύρου υπερυψηλής πίεσης 200 W χρησιμοποιείται συνήθως ως πηγή φωτός. Είναι κατασκευασμένο από γυαλί χαλαζία, με σφαιρικό σχήμα στη μέση και αρκετή ποσότητα υδραργύρου γεμάτο μέσα. Κατά τη λειτουργία, η εκκένωση μεταξύ των δύο ηλεκτροδίων προκαλεί την εξάτμιση του υδραργύρου και η πίεση στο εσωτερικό της σφαίρας αυξάνεται γρήγορα. Όταν ο υδράργυρος εξατμιστεί πλήρως, μπορεί να φτάσει σε 50-70 τυπικές ατμοσφαιρικές πιέσεις, κάτι που γενικά διαρκεί περίπου 5-15 λεπτά. Η φωταύγεια των λαμπτήρων υδραργύρου εξαιρετικά υψηλής πίεσης είναι το αποτέλεσμα της εκφόρτισης μεταξύ των ηλεκτροδίων, η οποία διαχωρίζει και μειώνει συνεχώς τα μόρια υδραργύρου και εκπέμπει φωτόνια. Εκπέμπει ισχυρό υπεριώδες και μπλε ιώδες φως, το οποίο είναι αρκετό για να διεγείρει διάφορες φθορίζουσες ουσίες, επομένως, χρησιμοποιείται ευρέως σε μικροσκόπια φθορισμού.
Προφυλάξεις για τη χρήση μικροσκοπίου φθορισμού
(1) Ακολουθήστε αυστηρά τις οδηγίες του εργοστασίου μικροσκοπίου φθορισμού και μην αλλάζετε το πρόγραμμα αυθαίρετα.
(2) Η επιθεώρηση πρέπει να διεξάγεται σε σκοτεινό δωμάτιο. Αφού μπείτε στο σκοτεινό θάλαμο, συνδέστε το ρεύμα και ανάψτε τη λάμπα υδραργύρου εξαιρετικά υψηλής πίεσης για 5-15 λεπτά. Αφού η πηγή φωτός εκπέμψει δυνατό φως και σταθεροποιηθεί, τα μάτια θα πρέπει να προσαρμοστούν πλήρως στο σκοτεινό θάλαμο πριν αρχίσουν να παρατηρούν το δείγμα.
(3) Για να αποφευχθεί η καταστροφή των ματιών από την υπεριώδη ακτινοβολία, πρέπει να φοράτε προστατευτικά γυαλιά κατά τη ρύθμιση της πηγής φωτός.
(4) Ο χρόνος επιθεώρησης θα πρέπει να είναι 1-2 ώρες κάθε φορά. Εάν υπερβαίνει τα 90 λεπτά, η φωτεινή ένταση της λυχνίας υδραργύρου υπερυψηλής πίεσης μειώνεται σταδιακά και ο φθορισμός εξασθενεί. Δείγματα που εκτέθηκαν σε υπεριώδη ακτινοβολία για 3-5 ημέρες
Μετά από min, ο φθορισμός επίσης μειώθηκε σημαντικά. Επομένως, η μέγιστη διάρκεια δεν πρέπει να υπερβαίνει τις 2-3 ώρες.
(5) Η διάρκεια ζωής της πηγής φωτός του μικροσκοπίου φθορισμού είναι περιορισμένη και το δείγμα θα πρέπει να εξεταστεί κεντρικά για εξοικονόμηση χρόνου
Εξοικονομήστε χρόνο και προστατέψτε την πηγή φωτός. Όταν ο καιρός είναι ζεστός, θα πρέπει να προστεθεί ένας ηλεκτρικός ανεμιστήρας για να διαχέει τη θερμότητα και να κρυώνει. Κατά την αντικατάσταση ενός νέου λαμπτήρα, ο χρόνος χρήσης πρέπει να καταγράφεται από την αρχή. Όταν το φως σβήσει και θέλετε να το χρησιμοποιήσετε ξανά, πρέπει να περιμένετε να κρυώσει αρκετά ο λαμπτήρας πριν τον ανάψετε. Αποφύγετε να ανάβετε την πηγή φωτός πολλές φορές την ημέρα.
(6) Παρατηρήστε το δείγμα αμέσως μετά τη χρώση, καθώς ο φθορισμός θα εξασθενήσει σταδιακά με την πάροδο του χρόνου. Εάν το δείγμα φυλάσσεται σε πλαστική σακούλα από πολυαιθυλένιο στους 4 βαθμούς, μπορεί να καθυστερήσει το χρόνο εξασθένησης του φθορισμού και να αποτρέψει την εξάτμιση του παράγοντα στερέωσης.
(7) Τα κριτήρια κρίσης για τη φωτεινότητα του φθορισμού χωρίζονται γενικά σε τέσσερα επίπεδα, συγκεκριμένα "ένα" - καθόλου ή ορατός ασθενής φθορισμός. "+" - Είναι ορατός μόνο ο ορατός φθορισμός. ++- Ορατό με έντονο φθορισμό. "+++" - Ορατός και εκθαμβωτικός φθορισμός.
