Πώς διαφέρει η μικροσκοπία φθορισμού από την ομοεστιακή μικροσκοπία λέιζερ
Μικροσκόπιο φθορισμού
1. Ένα μικροσκόπιο φθορισμού χρησιμοποιεί υπεριώδες φως ως πηγή φωτός για να φωτίσει το αντικείμενο που επιθεωρείται για να εκπέμπει φθορισμό και, στη συνέχεια, να παρατηρήσει το σχήμα και τη θέση του αντικειμένου κάτω από το μικροσκόπιο. Το μικροσκόπιο φθορισμού χρησιμοποιείται για τη μελέτη της απορρόφησης και μεταφοράς ουσιών μέσα στα κύτταρα, καθώς και για την κατανομή και την τοποθέτηση χημικών ουσιών. Ορισμένες ουσίες στα κύτταρα, όπως η χλωροφύλλη, μπορούν να φθορίσουν αφού ακτινοβοληθούν από τις υπεριώδεις ακτίνες. Ορισμένες ουσίες από μόνες τους δεν μπορούν να φθορίσουν, αλλά εάν χρωματιστούν με φθορίζουσες βαφές ή φθορίζοντα αντισώματα, μπορούν να φθορίσουν μετά από ακτινοβολία με υπεριώδεις ακτίνες. Το μικροσκόπιο φθορισμού είναι ένα από τα εργαλεία για ποιοτική και ποσοτική έρευνα σε τέτοιες ουσίες.
2. Αρχή του μικροσκοπίου φθορισμού:
(Α) Πηγή φωτός: Η φωτεινή πηγή εκπέμπει φως διαφόρων μηκών κύματος (από υπεριώδες έως υπέρυθρο).
(Β) Πηγή φωτός του φίλτρου διέγερσης: μεταδίδει φως συγκεκριμένου μήκους κύματος που μπορεί να προκαλέσει φθορισμό του δείγματος, ενώ εμποδίζει το φως που είναι άχρηστο για τη διέγερση του φθορισμού.
(Γ) Δείγματα φθορισμού: Γενικά χρωματίζονται με φθορίζουσες χρωστικές.
(Δ) Φίλτρο αποκλεισμού: Αποκλείει το φως διέγερσης που δεν απορροφάται από το δείγμα και εκπέμπει επιλεκτικά φθορισμό. Ορισμένα μήκη κύματος στον φθορισμό μεταδίδονται επίσης επιλεκτικά. Ένα μικροσκόπιο που χρησιμοποιεί το υπεριώδες φως ως πηγή φωτός για να προκαλέσει τον φθορισμό του φωτισμένου αντικειμένου. Το ηλεκτρονικό μικροσκόπιο συναρμολογήθηκε για πρώτη φορά το 1931 στο Βερολίνο της Γερμανίας από τους Knorr και Hallowska. Αυτό το μικροσκόπιο χρησιμοποιεί μια δέσμη ηλεκτρονίων υψηλής ταχύτητας αντί για μια δέσμη φωτός. Δεδομένου ότι το μήκος κύματος της ροής των ηλεκτρονίων είναι πολύ μικρότερο από αυτό του φωτός, η μεγέθυνση του ηλεκτρονικού μικροσκοπίου μπορεί να φτάσει τις 800,000 φορές και το ελάχιστο όριο ανάλυσης είναι 0,2 νανόμετρα. Το ηλεκτρονικό μικροσκόπιο σάρωσης, το οποίο άρχισε να χρησιμοποιείται το 1963, επιτρέπει στους ανθρώπους να δουν τις μικροσκοπικές δομές στην επιφάνεια των αντικειμένων.
3. Πεδίο εφαρμογής: Χρησιμοποιείται για μεγέθυνση εικόνων μικρών αντικειμένων. Χρησιμοποιείται γενικά στην παρατήρηση της βιολογίας, της ιατρικής, των μικροσκοπικών σωματιδίων κ.λπ.
ομοεστιακό μικροσκόπιο
1. Το ομοεστιακό μικροσκόπιο προσθέτει έναν ημι-ανακλαστικό ημι-φακό στην οπτική διαδρομή του ανακλώμενου φωτός, ο οποίος διαθλά το ανακλώμενο φως που έχει περάσει από τον φακό σε άλλες κατευθύνσεις. Υπάρχει ένα διάφραγμα με μια τρύπα καρφίτσας στην εστία του και η τρύπα καρφίτσας βρίσκεται Στο εστιακό σημείο, πίσω από το διάφραγμα, υπάρχει ένας σωλήνας φωτοπολλαπλασιαστή. Μπορεί να φανταστεί κανείς ότι το ανακλώμενο φως πριν και μετά την εστίαση του φωτός ανίχνευσης περνά μέσα από αυτό το ομοεστιακό σύστημα και δεν μπορεί να εστιαστεί στη μικρή τρύπα και θα μπλοκαριστεί από το διάφραγμα. Αυτό που μετρά λοιπόν το φωτόμετρο είναι η ένταση του ανακλώμενου φωτός στην εστίαση.
2. Αρχή: Τα παραδοσιακά οπτικά μικροσκόπια χρησιμοποιούν πηγές φωτός πεδίου και η εικόνα κάθε σημείου του δείγματος θα παρεμβάλλεται από τη διάθλαση ή το σκεδαζόμενο φως από γειτονικά σημεία. Τα ομοεστιακά μικροσκόπια σάρωσης λέιζερ χρησιμοποιούν ακτίνες λέιζερ για να σχηματίσουν σημειακές πηγές φωτός μέσω φωτιζόμενων οπών για να φωτίσουν το εσωτερικό του δείγματος. Κάθε σημείο του εστιακού επιπέδου σαρώνεται και το φωτισμένο σημείο του δείγματος απεικονίζεται στην οπή ανίχνευσης, η οποία λαμβάνεται σημείο προς σημείο ή γραμμή προς γραμμή από τον σωλήνα φωτοπολλαπλασιαστή (PMT) ή τη συσκευή ψυχρής σύζευξης (cCCD) πίσω από την ανίχνευση pinhole, και είναι γρήγορα Μια φθορίζουσα εικόνα σχηματίζεται στην οθόνη της οθόνης του υπολογιστή. Η οπή φωτισμού και η οπή ανίχνευσης είναι συζευγμένες σε σχέση με το εστιακό επίπεδο του αντικειμενικού φακού. Τα σημεία στο εστιακό επίπεδο εστιάζονται ταυτόχρονα στην οπή φωτισμού και στην οπή εκπομπής. Σημεία έξω από το εστιακό επίπεδο δεν θα απεικονίζονται στην οπή ανίχνευσης. Αυτό λαμβάνεται Οι ομοεστιακές εικόνες είναι οπτικές διατομές δειγμάτων, που ξεπερνούν τα μειονεκτήματα των θολών εικόνων στα συνηθισμένα μικροσκόπια.
3. Τομείς εφαρμογής: Περιλαμβάνει ιατρική, επιστημονική έρευνα ζώων και φυτών, βιοχημεία, βακτηριολογία, κυτταρική βιολογία, εμβρυολογία ιστών, επιστήμη τροφίμων, γενετική, φαρμακολογία, φυσιολογία, οπτική, παθολογία, βοτανική, νευροεπιστήμη, θαλάσσια βιολογία και επιστήμη υλικών , ηλεκτρονική επιστήμη , μηχανική, πετρελαιογεωλογία, ορυκτολογία.
