Πώς να επιλέξετε ανάμεσα σε ένα ανεστραμμένο μικροσκόπιο και ένα μικροσκόπιο φθορισμού;
Σε κυτταροκαλλιέργεια και σχετικά πειράματα παραγώγων, το μικροσκόπιο είναι ένα πολύ σημαντικό όργανο. Επί του παρόντος, υπάρχουν διάφοροι τύποι μικροσκοπίων στην αγορά. Είναι πρόκληση να επιλέξεις ένα μικροσκόπιο που να καλύπτει τις ανάγκες και να είναι εφαρμόσιμο. Ακολουθεί μια εισαγωγή στις αρχές των ανεστραμμένων μικροσκοπίων και των μικροσκοπίων φθορισμού, ώστε να μπορείτε να επιλέξετε εύκολα.
Η σύνθεση του ανεστραμμένου μικροσκοπίου είναι η ίδια με αυτή του συνηθισμένου μικροσκοπίου, που περιλαμβάνει κυρίως τρία μέρη: το μηχανικό μέρος, το τμήμα φωτισμού και το οπτικό μέρος. Η σύνθεση του ανεστραμμένου μικροσκοπίου είναι η ίδια με εκείνη του συνηθισμένου κατακόρυφου μικροσκοπίου, με τη διαφορά ότι ο αντικειμενικός φακός και το σύστημα φωτισμού είναι αντίστροφα, το πρώτο είναι κάτω από τη σκηνή και το δεύτερο είναι πάνω από τη σκηνή. Μια τέτοια δομή μπορεί να επεκτείνει σημαντικά την αποτελεσματική απόσταση μεταξύ του συστήματος συγκέντρωσης φωτισμού και της σκηνής, η οποία είναι βολική για την τοποθέτηση παχύτερων αντικειμένων προς παρατήρηση, όπως πιάτα καλλιέργειας και φιάλες κυτταροκαλλιέργειας (φυσικά, διατίθενται και γυάλινες διαφάνειες κ.λπ.) , και ταυτόχρονα, η απόσταση μεταξύ του αντικειμενικού φακού και του υλικού Η απόσταση εργασίας μεταξύ τους δεν χρειάζεται να είναι πολύ μεγάλη. Τα ανεστραμμένα μικροσκόπια χρησιμοποιούνται για παρατήρηση μικροοργανισμών, κυττάρων, βακτηρίων, ιστοκαλλιέργειας, εναιωρημάτων, ιζημάτων κ.λπ. σε ιατρικές μονάδες και μονάδες υγείας, ιδρύματα τριτοβάθμιας εκπαίδευσης και ερευνητικά ιδρύματα. Μπορεί να παρατηρεί συνεχώς τη διαδικασία αναπαραγωγής και διαίρεσης κυττάρων, βακτηρίων κ.λπ. στο μέσο καλλιέργειας και μπορεί να τραβήξει φωτογραφίες οποιασδήποτε μορφής στη διαδικασία. Χρησιμοποιείται ευρέως στην κυτταρολογία, την παρασιτολογία, την ογκολογία, την ανοσολογία, τη γενετική μηχανική, τη βιομηχανική μικροβιολογία, τη βοτανική και άλλους τομείς.
Το μικροσκόπιο φθορισμού χρησιμοποιείται για τη μελέτη της απορρόφησης και μεταφοράς ουσιών στα κύτταρα, την κατανομή και τον εντοπισμό χημικών ουσιών κ.λπ. Για το αντικείμενο που εξετάζεται, υπάρχουν δύο τρόποι δημιουργίας φθορισμού: ο αυτοφθορισμός, ο οποίος εκπέμπει φθορισμό απευθείας μετά την ακτινοβολία με υπεριώδη ακτινοβολία φως; Ορισμένες ουσίες στα κύτταρα, όπως η χλωροφύλλη, παράγουν αυτοφθορισμό αφού ακτινοβοληθούν από τις υπεριώδεις ακτίνες. αν και ορισμένες ουσίες οι ίδιες δεν μπορούν να φθορίσουν, μπορούν επίσης να εκπέμψουν δευτερογενή φθορισμό αφού χρωματιστούν με φθορίζουσες βαφές ή φθορίζοντα αντισώματα αφού ακτινοβοληθούν από τις υπεριώδεις ακτίνες. Το μικροσκόπιο φθορισμού χρησιμοποιεί μια σημειακή πηγή φωτός με υψηλή φωτεινή απόδοση για να εκπέμπει φως συγκεκριμένου μήκους κύματος (υπεριώδες φως 365 nm ή μωβ μπλε φως 420 nm) μέσω του συστήματος φίλτρου ως φως διέγερσης και αφού διεγείρει τις φθορίζουσες ουσίες στο δείγμα για να εκπέμπει φθορισμό χρώματα, τότε η παρατήρηση πραγματοποιείται μέσω της μεγέθυνσης του αντικειμενικού φακού και του προσοφθάλμιου φακού. Με αυτόν τον τρόπο, κάτω από ένα φόντο έντονης αντίθεσης, ακόμα κι αν ο φθορισμός είναι πολύ ασθενής, είναι εύκολο να αναγνωριστεί και έχει υψηλή ευαισθησία. Χρησιμοποιείται κυρίως για την έρευνα της κυτταρικής δομής και λειτουργίας και της χημικής σύνθεσης.
Τα μικροσκόπια φθορισμού χωρίζονται σε τύπο μετάδοσης και τύπο επι-εκβολής, ο πρώτος είναι πιο πρωτόγονος και ο δεύτερος πιο προηγμένος. Η βασική δομή των δύο τύπων μικροσκοπίων φθορισμού είναι παρόμοια, η κύρια διαφορά είναι: το φως διέγερσης του τύπου μετάδοσης περνά μέσα από το δείγμα και ολόκληρο το δείγμα παράγει φθορισμό, ο οποίος στη συνέχεια εισέρχεται στον αντικειμενικό φακό. Όσο μεγαλύτερη είναι η μεγέθυνση, τόσο πιο αδύναμος είναι ο φθορισμός. το φως διέγερσης του τύπου επι-εκπομπής προβάλλεται στην επιφάνεια του δείγματος, η επιφάνεια του δείγματος παράγει φθορισμό και ο φθορισμός εισέρχεται ξανά στον αντικειμενικό φακό. Όσο μεγαλύτερη είναι η μεγέθυνση, τόσο ισχυρότερος είναι ο φθορισμός, ο οποίος είναι κατάλληλος για παρατήρηση υψηλής μεγέθυνσης. Τα κύρια συστατικά του μικροσκοπίου φθορισμού περιλαμβάνουν μια πηγή φωτός λαμπτήρα υδραργύρου, μια πλάκα φίλτρου διέγερσης, ένα διχρωμικό κάτοπτρο (τύπος επεισοδίου), μια πιεσμένη πλάκα φίλτρου και έναν συμπυκνωτή σκοτεινού πεδίου (τύπος μετάδοσης) κ.λπ. ισχυρή παραγωγή θερμότητας λαμπτήρων υδραργύρου, οι περισσότεροι από αυτούς είναι επίσης εξοπλισμένοι με φίλτρα απορρόφησης θερμότητας. Ορισμένα μικροσκόπια φθορισμού έχουν επίσης στόχους αντίθεσης φάσης και δακτυλιοειδή διαφράγματα, επομένως είναι δυνατές παρατηρήσεις αντίθεσης φάσης. Υπάρχουν επίσης μικροσκόπια φθορισμού που υιοθετούν μια ανεστραμμένη δομή, ένα άλλο ανεστραμμένο μικροσκόπιο κ.ο.κ.
Επιπλέον, τα προαναφερθέντα μικροσκόπια μπορούν να συναρμολογηθούν σε ψηφιακό μικροσκόπιο εγκαθιστώντας ένα CCD, το οποίο μετατρέπει τη φυσική εικόνα που βλέπει το μικροσκόπιο σε εικόνα σε υπολογιστή μέσω μετατροπής ψηφιακού σε αναλογικό. Επομένως, μπορούμε να αλλάξουμε την έρευνα στο μικροσκοπικό πεδίο από την παραδοσιακή συνηθισμένη διόφθαλμη παρατήρηση στην αναπαραγωγή στην οθόνη, βελτιώνοντας έτσι την απόδοση της εργασίας.
