Εισαγωγή στην επιλογή μεταξύ ανεστραμμένων μικροσκοπίων και μικροσκοπίων φθορισμού
Το μικροσκόπιο είναι ένα σημαντικό όργανο στην κυτταροκαλλιέργεια και σε σχετικά πειράματα παραγώγων. Επί του παρόντος, υπάρχουν διάφοροι τύποι μικροσκοπίων στην αγορά και η επιλογή ενός μικροσκοπίου που να καλύπτει τις ανάγκες και να είναι κατάλληλο αποτελεί πρόκληση. Παρακάτω, θα εισαγάγουμε τις αρχές των ανεστραμμένων μικροσκοπίων και των μικροσκοπίων φθορισμού για εύκολη επιλογή.
Η σύνθεση ενός ανεστραμμένου μικροσκοπίου είναι η ίδια με εκείνη ενός κανονικού μικροσκοπίου, που αποτελείται κυρίως από τρία μέρη: μηχανικό μέρος, τμήμα φωτισμού και οπτικό μέρος. Η σύνθεση ενός ανεστραμμένου μικροσκοπίου είναι η ίδια με ένα κανονικό όρθιο μικροσκόπιο, με τη διαφορά ότι ο αντικειμενικός φακός και το σύστημα φωτισμού αντιστρέφονται, με το πρώτο κάτω από τη σκηνή και το δεύτερο πάνω από τη σκηνή. Αυτή η δομή επιτρέπει σημαντική αύξηση της αποτελεσματικής απόστασης μεταξύ του συστήματος εστίασης φωτισμού και της σκηνής, καθιστώντας ευκολότερη την τοποθέτηση παχύτερων οργάνων παρατήρησης, όπως πιάτα καλλιέργειας και μπουκάλια κυτταροκαλλιέργειας (φυσικά, οι γυάλινες διαφάνειες είναι επίσης αποδεκτές), ενώ η απόσταση εργασίας μεταξύ του αντικειμενικού φακού και του υλικού δεν χρειάζεται να είναι πολύ μεγάλη. Το ανεστραμμένο μικροσκόπιο χρησιμοποιείται από ιατρικά και υγειονομικά ιδρύματα, πανεπιστήμια και ερευνητικά ιδρύματα για την παρατήρηση μικροοργανισμών, κυττάρων, βακτηρίων, ιστοκαλλιέργειας, εναιωρημάτων, ιζημάτων κ.λπ. Μπορεί να παρατηρεί συνεχώς τη διαδικασία αναπαραγωγής και διαίρεσης κυττάρων και βακτηρίων στο μέσο καλλιέργειας και μπορεί να συλλάβει οποιαδήποτε κατάσταση κατά τη διάρκεια αυτής της διαδικασίας. Χρησιμοποιείται ευρέως σε τομείς όπως η κυτταρολογία, η παρασιτολογία, η ογκολογία, η ανοσολογία, η γενετική μηχανική, η βιομηχανική μικροβιολογία, η βοτανική κ.λπ.
Το μικροσκόπιο φθορισμού χρησιμοποιείται για τη μελέτη της απορρόφησης, μεταφοράς, κατανομής και εντοπισμού ουσιών μέσα στα κύτταρα. Για το δοκιμασμένο αντικείμενο, υπάρχουν δύο τρόποι δημιουργίας φθορισμού: αυθόρμητος φθορισμός, ο οποίος εκπέμπει απευθείας φθορισμό μετά από ακτινοβολία UV. Ο δευτερογενής φθορισμός εμφανίζεται όταν το παρατηρούμενο αντικείμενο υποβάλλεται σε επεξεργασία με φθορίζουσες βαφές και στη συνέχεια ακτινοβολείται με υπεριώδες φως για να εκπέμπει φθορισμό. Ορισμένες ουσίες στα κύτταρα, όπως η χλωροφύλλη, παράγουν αυθόρμητο φθορισμό όταν εκτίθενται στην υπεριώδη ακτινοβολία. Ορισμένες ουσίες οι ίδιες δεν μπορούν να εκπέμψουν φθορισμό, αλλά εάν χρωματιστούν με φθορίζουσες βαφές ή φθορίζοντα αντισώματα, μπορούν επίσης να εκπέμψουν δευτερογενή φθορισμό αφού ακτινοβοληθούν με υπεριώδες φως. Το μικροσκόπιο φθορισμού χρησιμοποιεί μια εξαιρετικά αποτελεσματική σημειακή πηγή φωτός για να εκπέμπει ένα ορισμένο μήκος κύματος φωτός (υπεριώδες φως 365 nm ή μωβ μπλε φως 420 nm) μέσω ενός συστήματος έγχρωμου φίλτρου ως φως διέγερσης, το οποίο διεγείρει τις φθορίζουσες ουσίες μέσα στο δείγμα για να εκπέμψει διάφορα χρώματα φθορισμού και μετά την παρατήρηση του αντικειμενικού φακού. Με αυτόν τον τρόπο, ακόμη και με ασθενή φθορισμό σε έντονο φόντο, είναι εύκολο να αναγνωριστεί και έχει υψηλή ευαισθησία. Χρησιμοποιείται κυρίως για τη μελέτη της κυτταρικής δομής, λειτουργίας και χημικής σύνθεσης.
