Εισαγωγή στα πλεονεκτήματα και τα μειονεκτήματα των μικροσκοπίων σάρωσης με λέιζερ πολλαπλών φώτων
Πλεονεκτήματα του πολυφωτονικού μικροσκοπίου σάρωσης λέιζερ:
1. Διεγερμένη από το κόκκινο ή το υπέρυθρο φως, η σκέδαση του φωτός είναι μικρή και η σκέδαση των μικρών σωματιδίων είναι αντιστρόφως ανάλογη με την τέταρτη δύναμη του μήκους κύματος.
2. Περισσότερα διάσπαρτα φωτόνια από τη διατομή- απεικόνισης μπορούν να συλλεχθούν χωρίς την ανάγκη για τρύπες καρφίτσας.
3. Οι τρύπες δεν μπορούν να διακρίνουν τα διάσπαρτα φωτόνια που εκπέμπονται από περιοχές αποεστίασης ή εστίασης και τα πολυφωτόνια έχουν καλύτερη αναλογία σήματος-προς-θόρυβο σε βαθιά απεικόνιση.
4. Το υπεριώδες ή ορατό φως που χρησιμοποιείται για τη διέγερση ενός φωτονίου απορροφάται εύκολα και εξασθενεί από το δείγμα πριν η δέσμη φτάσει στο εστιακό επίπεδο, καθιστώντας δύσκολη τη διέγερση των βαθιών στρωμάτων.
5. Όσον αφορά την παρατήρηση με βιολογικό μικροσκόπιο, η πρώτη σκέψη είναι να μην βλάψετε την ενεργό κατάσταση του ίδιου του οργανισμού, να διατηρήσετε την κυκλοφορία του νερού, τη συγκέντρωση ιόντων, το οξυγόνο και τα θρεπτικά συστατικά. Στο πεδίο της παρατήρησης φωτός, τόσο η θερμική ενέργεια όσο και η ενέργεια των φωτονίων πρέπει να παραμένουν εντός της δόσης ακτινοβολίας και η φωτεινή ενέργεια που δεν καταστρέφει τα κύτταρα.
6. Η πολυφωτονική μικροσκοπία έχει πολλά πλεονεκτήματα. Όσον αφορά την τριδιάστατη ανάλυση, την εισβολή βάθους, την αποτελεσματικότητα σκέδασης, το φως φόντου, την αναλογία σήματος προς-θόρυβο, τον έλεγχο κ.λπ., υπάρχουν χαρακτηριστικά που τα προηγούμενα μικροσκόπια λέιζερ δεν διαθέτουν ή δεν μπορούν να ξεπεράσουν
Μειονεκτήματα του μικροσκοπίου σάρωσης λέιζερ πολλαπλών φωτονίων:
1. Μόνο για απεικόνιση φθορισμού.
2. Εάν το δείγμα περιλαμβάνει χρωμοφόρα που μπορούν να απορροφήσουν το φως διέγερσης, το δείγμα μπορεί να υποστεί θερμική βλάβη.
3. Η ανάλυση είναι ελαφρώς μειωμένη, αν και μπορεί να βελτιωθεί με την ταυτόχρονη χρήση ομοεστιακών μικρών οπών, υπάρχει απώλεια σήματος.
4. Λόγω των περιορισμών των ακριβών υπερταχέων λέιζερ, το κόστος των μικροσκοπίων σάρωσης πολλαπλών φωτονίων είναι σχετικά υψηλό.
