Απαιτήσεις για την παραγωγή δειγμάτων μικροσκοπίου φθορισμού
(1) γυάλινη τσουλήθρα
Το πάχος της διαφάνειας πρέπει να είναι μεταξύ 0,8 και 1,2 mm. Εάν η πλάκα είναι πολύ παχιά, αφενός, απορροφά περισσότερο φως και αφετέρου, δεν μπορεί να προκαλέσει τη συγκέντρωση φωτός διέγερσης στο δείγμα. Η αντικειμενοφόρος πλάκα πρέπει να είναι λεία, ομοιόμορφη σε πάχος και απαλλαγμένη από εμφανή αυθόρμητο φθορισμό. Μερικές φορές χρειάζονται διαφάνειες από γυαλί χαλαζία.
(2) Γυάλινη τσουλήθρα καλύμματος
Το πάχος του γυαλιού καλύμματος είναι περίπου 0,17 mm, το οποίο είναι λείο και καθαρό. Προκειμένου να ενισχυθεί η διέγερση, μπορεί επίσης να χρησιμοποιηθεί γυαλί κάλυψης παρεμβολής. Πρόκειται για ένα ειδικά σχεδιασμένο γυαλί κάλυψης με πολλά στρώματα ουσιών (όπως το φθοριούχο μαγνήσιο) που έχουν διαφορετικά αποτελέσματα παρεμβολής σε διαφορετικά μήκη κύματος φωτός. Μπορεί να επιτρέψει στον φθορισμό να περάσει ομαλά, ενώ η διέγερση ανάκλασης μπορεί να διεγείρει το δείγμα.
(3) Δείγμα
Οι φέτες ιστού ή άλλα δείγματα δεν πρέπει να είναι πολύ παχιά, καθώς το φως διέγερσης καταναλώνεται ως επί το πλείστον στο κάτω μέρος του δείγματος, ενώ το πάνω μέρος που παρατηρείται άμεσα από τον αντικειμενικό φακό δεν διεγείρεται πλήρως. Επιπλέον, η επικάλυψη κυττάρων ή η κάλυψη ακαθαρσιών μπορεί να επηρεάσει την κρίση.
(4) Σφραγιστικό
Η γλυκερίνη χρησιμοποιείται συνήθως ως παράγοντας στερέωσης και πρέπει να είναι απαλλαγμένη από αυθόρμητο φθορισμό, άχρωμη και διαφανής. Η φωτεινότητα του φθορισμού είναι φωτεινότερη σε pH 8,5~9,5 και δεν είναι εύκολο να εξασθενίσει γρήγορα. Επομένως, ένα ίσο μείγμα γλυκερόλης και ρυθμιστικού διαλύματος ανθρακικού 0,5 mol/l σε pH 9.0-9.5 χρησιμοποιείται συνήθως ως στεγανοποιητικός παράγοντας.
(5) Λάδι καθρέφτη
Κατά την παρατήρηση δειγμάτων χρησιμοποιώντας μικροσκόπιο φθορισμού σκοτεινού πεδίου και μικροσκόπιο λαδιού, είναι απαραίτητο να χρησιμοποιείτε λάδι φακών. Είναι καλύτερο να χρησιμοποιήσετε ένα ειδικά κατασκευασμένο μη φθορίζον λάδι φακών, το οποίο μπορεί επίσης να αντικατασταθεί με γλυκερίνη όπως αναφέρθηκε παραπάνω. Μπορεί επίσης να χρησιμοποιηθεί υγρή παραφίνη, αλλά ο δείκτης διάθλασης είναι χαμηλός και έχει μικρή επίδραση στην ποιότητα της εικόνας.
Προφυλάξεις για τη χρήση μικροσκοπίου φθορισμού
(1) Ακολουθήστε αυστηρά τις εργοστασιακές απαιτήσεις του μικροσκοπίου φθορισμού και μην αλλάζετε το πρόγραμμα αυθαίρετα.
(2) Η επιθεώρηση πρέπει να διεξάγεται σε σκοτεινό δωμάτιο. Αφού μπείτε στο σκοτεινό θάλαμο, συνδέστε το τροφοδοτικό και ανάψτε τη λάμπα υδραργύρου εξαιρετικά υψηλής πίεσης για 5 έως 15 λεπτά. Αφού η πηγή φωτός εκπέμψει δυνατό φως και σταθεροποιηθεί, τα μάτια προσαρμόζονται πλήρως στο σκοτεινό θάλαμο πριν αρχίσουν να παρατηρούν το δείγμα.
(3) Για να αποφευχθεί η βλάβη στα μάτια από την υπεριώδη ακτινοβολία, πρέπει να φοράτε προστατευτικά γυαλιά κατά τη ρύθμιση της πηγής φωτός.
(4) Ο χρόνος επιθεώρησης θα πρέπει να είναι 1-2 ώρες κάθε φορά. Εάν υπερβαίνει τα 90 λεπτά, η φωτεινή ένταση της λυχνίας υδραργύρου υπερυψηλής πίεσης μειώνεται σταδιακά και ο φθορισμός εξασθενεί. Μετά την έκθεση στην υπεριώδη ακτινοβολία για 3-5 λεπτά, ο φθορισμός του δείγματος μειώθηκε επίσης σημαντικά. Επομένως, δεν πρέπει να υπερβαίνει τις 2-3 ώρες το πολύ.
(5) Η διάρκεια ζωής της φωτεινής πηγής μικροσκοπίου φθορισμού είναι περιορισμένη και το δείγμα θα πρέπει να επιθεωρηθεί κεντρικά για εξοικονόμηση χρόνου και προστασία της πηγής φωτός. Όταν ο καιρός είναι ζεστός, θα πρέπει να προστεθεί ένας ηλεκτρικός ανεμιστήρας για να διαχέει τη θερμότητα και να κρυώνει. Κατά την αντικατάσταση ενός νέου λαμπτήρα, ο χρόνος χρήσης πρέπει να καταγράφεται από την αρχή. Όταν η λάμπα είναι σβηστή και θέλει να χρησιμοποιηθεί ξανά, πρέπει να περιμένει να κρυώσει τελείως ο λαμπτήρας πριν ανάψει. Αποφύγετε την πολλαπλή ανάφλεξη της πηγής φωτός.
(6) Παρατηρήστε το δείγμα αμέσως μετά τη χρώση, καθώς ο φθορισμός σταδιακά μειώνεται με την πάροδο του χρόνου. Εάν το δείγμα φυλάσσεται σε πλαστική σακούλα από πολυαιθυλένιο στους 4 βαθμούς, μπορεί να καθυστερήσει το χρόνο εξασθένησης του φθορισμού και να αποτρέψει την εξάτμιση του παράγοντα στερέωσης.
(7) Το πρότυπο κρίσης για τη φωτεινότητα του φθορισμού χωρίζεται γενικά σε τέσσερα επίπεδα, συγκεκριμένα "ένα" - καθόλου ή ορατός ασθενής φθορισμός. συν - Μόνο καθαρά ορατός φθορισμός μπορεί να φανεί. plus plus - Ορατό με έντονο φθορισμό. 'συν συν συν' - Ορατός και εκθαμβωτικός φθορισμός.
