Απαιτήσεις για την παραγωγή δειγμάτων για το μικροσκόπιο φθορισμού
(1) Γυάλινη τσουλήθρα
Το πάχος της διαφάνειας πρέπει να είναι μεταξύ 0,8 και 1,2 mm. Εάν η πλάκα είναι πολύ παχιά, αφενός, θα απορροφήσει περισσότερο φως και, αφετέρου, δεν θα επιτρέψει στο φως διέγερσης να συγκεντρωθεί στο δείγμα. Η γυάλινη πλάκα πρέπει να είναι λεία, ομοιόμορφη σε πάχος και να μην έχει εμφανή αυθόρμητο φθορισμό. Μερικές φορές χρειάζονται διαφάνειες από γυαλί χαλαζία.
(2) Γυάλινη τσουλήθρα καλύμματος
Το πάχος του γυαλιού καλύμματος είναι περίπου 0.17 mm και είναι λείο. Προκειμένου να ενισχυθεί το φως διέγερσης, μπορεί επίσης να χρησιμοποιηθεί γυαλί κάλυψης παρεμβολής. Πρόκειται για ένα ειδικά σχεδιασμένο γυαλί κάλυψης με πολλά στρώματα ουσιών (όπως το φθοριούχο μαγνήσιο) που έχουν διαφορετικές επιδράσεις παρεμβολής στο φως διαφορετικών μηκών κύματος. Μπορεί να επιτρέψει στον φθορισμό να περάσει ομαλά, ενώ το φως διέγερσης ανάκλασης μπορεί να διεγείρει το δείγμα.
(3) Δείγμα
Οι φέτες ιστού ή άλλα δείγματα δεν πρέπει να είναι πολύ παχιά. Εάν είναι πολύ παχιά, το μεγαλύτερο μέρος του φωτός διέγερσης καταναλώνεται στο κάτω μέρος του δείγματος, ενώ το πάνω μέρος που παρατηρείται άμεσα από τον αντικειμενικό φακό δεν διεγείρεται πλήρως. Επιπλέον, η επικάλυψη κυττάρων ή η κάλυψη ακαθαρσιών μπορεί να επηρεάσει την κρίση.
(4) Σφραγιστικό
Η γλυκερίνη χρησιμοποιείται συνήθως ως μέσο στερέωσης, το οποίο δεν πρέπει να έχει αυθόρμητο φθορισμό, άχρωμο και διαφανές. Η φωτεινότητα του φθορισμού είναι σχετικά φωτεινή σε pH 8.5-9.5 και δεν είναι εύκολο να εξαφανιστεί γρήγορα. Ως εκ τούτου, ένα ίσο μείγμα γλυκερίνης και ρυθμιστικού διαλύματος ανθρακικού 0.5mol/lpH9.0-9.5 χρησιμοποιείται συνήθως ως παράγοντας στερέωσης.
(5) Λάδι καθρέφτη
Όταν χρησιμοποιείτε μικροσκόπιο φθορισμού σκοτεινού πεδίου και μικροσκόπιο λαδιού για την παρατήρηση δειγμάτων, είναι απαραίτητο να χρησιμοποιείτε λάδι φακών. Είναι καλύτερο να χρησιμοποιήσετε ένα ειδικά κατασκευασμένο μη φθορίζον λάδι φακών, το οποίο μπορεί επίσης να αντικατασταθεί με γλυκερίνη όπως αναφέρθηκε παραπάνω. Μπορεί επίσης να χρησιμοποιηθεί υγρή παραφίνη, αλλά ο δείκτης διάθλασης είναι χαμηλός και έχει μικρή επίδραση στην ποιότητα της εικόνας.
