Η διαφορά μεταξύ της συνηθισμένης οπτικής μικροσκοπίας και της μικροσκοπίας φθορισμού
Οπτικό μικροσκόπιο: Είναι ένα οπτικό όργανο που χρησιμοποιεί οπτικές αρχές για τη μεγέθυνση και την απεικόνιση μικρών αντικειμένων που δεν διακρίνονται από το ανθρώπινο μάτι, προκειμένου να εξάγει μικροδομικές πληροφορίες για τους ανθρώπους.
Μικροσκόπιο φθορισμού: Το μικροσκόπιο φθορισμού χρησιμοποιεί υπεριώδες φως ως πηγή φωτός για να φωτίσει το αντικείμενο που εξετάζεται, προκαλώντας το να εκπέμπει φθορισμό και, στη συνέχεια, να παρατηρήσει το σχήμα και τη θέση του αντικειμένου κάτω από το μικροσκόπιο. Το μικροσκόπιο φθορισμού χρησιμοποιείται για τη μελέτη της απορρόφησης, μεταφοράς, κατανομής και εντοπισμού ενδοκυτταρικών ουσιών. Ορισμένες ουσίες στα κύτταρα, όπως η χλωροφύλλη, μπορούν να εκπέμπουν φθορισμό μετά την έκθεση τους στην υπεριώδη ακτινοβολία. Αν και ορισμένες ουσίες οι ίδιες δεν μπορούν να εκπέμψουν φθορισμό, μπορούν επίσης να εκπέμψουν φθορισμό αφού χρωματιστούν με φθορίζουσες βαφές ή φθορίζοντα αντισώματα και ακτινοβοληθούν με υπεριώδες φως. Το μικροσκόπιο φθορισμού είναι ένα από τα εργαλεία για ποιοτική και ποσοτική έρευνα για αυτές τις ουσίες.
Ένα οπτικό μικροσκόπιο αποτελείται γενικά από μια σκηνή, ένα σύστημα φωτισμού προβολέων, έναν αντικειμενικό φακό, έναν προσοφθάλμιο φακό και έναν μηχανισμό εστίασης. Το σύστημα φωτισμού σποτ μπορεί να αποκτήσει διαφορετικές μεθόδους παρατήρησης, όπως σκοτεινά σημεία σε φωτεινό φόντο (γνωστό ως φωτεινό φωτισμό πεδίου) ή φωτεινά σημεία σε σκούρο φόντο (γνωστό ως φωτισμός σκοτεινού πεδίου) αλλάζοντας τη μέθοδο φωτισμού, προκειμένου να ανακαλύψει καλύτερα και παρατηρήστε λεπτές δομές σε διαφορετικές καταστάσεις.
Το μικροσκόπιο φθορισμού και το συνηθισμένο μικροσκόπιο έχουν τις ακόλουθες διαφορές:
1. Η μέθοδος φωτισμού είναι συνήθως τύπου σταγόνας, όπου η πηγή φωτός προβάλλεται στο δείγμα μέσω του αντικειμενικού φακού.
2. Η πηγή φωτός είναι το υπεριώδες φως, με μικρότερο μήκος κύματος και υψηλότερη ανάλυση από τα συνηθισμένα μικροσκόπια.
3. Υπάρχουν δύο ειδικά φίλτρα, το ένα μπροστά από την πηγή φωτός χρησιμοποιείται για να φιλτράρει το ορατό φως και αυτό που βρίσκεται μεταξύ του προσοφθάλμιου φακού και του αντικειμενικού φακού χρησιμοποιείται για το φιλτράρισμα του υπεριώδους φωτός για την προστασία του ανθρώπινου ματιού.
Το μικροσκόπιο φθορισμού είναι επίσης ένας τύπος οπτικού μικροσκοπίου, με κύρια διαφορά τα διαφορετικά μήκη κύματος διέγερσης μεταξύ των δύο. Αυτό καθορίζει τις διαφορές στη δομή και τη χρήση μεταξύ των μικροσκοπίων φθορισμού και των συνηθισμένων οπτικών μικροσκοπίων.
Η μικροσκοπία φθορισμού είναι ένα θεμελιώδες εργαλείο για την κυτταροχημεία του ανοσοφθορισμού. Αποτελείται από κύρια εξαρτήματα όπως η πηγή φωτός, το σύστημα πλάκας φίλτρου και το οπτικό σύστημα. Είναι η χρήση ενός συγκεκριμένου μήκους κύματος φωτός για να διεγείρει το δείγμα και να εκπέμπει φθορισμό, ο οποίος μεγεθύνεται μέσω ενός συστήματος αντικειμενικού και προσοφθάλμιου φακού για την παρατήρηση της εικόνας φθορισμού του δείγματος.
