Η διαφορά μεταξύ μικροσκοπίας δύο φωτονίων και ομοεστιακής μικροσκοπίας λέιζερ
Το ομοεστιακό μικροσκόπιο λέιζερ είναι ένα σύνολο συστημάτων παρατήρησης, ανάλυσης και εξόδου που χρησιμοποιούν λέιζερ ως πηγή φωτός, συζευγμένη αρχή εστίασης και συσκευή με βάση το παραδοσιακό οπτικό μικροσκόπιο και ψηφιακή επεξεργασία εικόνας του παρατηρούμενου αντικειμένου με χρήση υπολογιστή. Τα κύρια συστήματα περιλαμβάνουν πηγές φωτός λέιζερ, αυτόματα μικροσκόπια, μονάδες σάρωσης (συμπεριλαμβανομένων ομοεστιακών καναλιών οπτικής διαδρομής και οπών, καθρεφτών σάρωσης, ανιχνευτές), επεξεργαστές ψηφιακού σήματος, υπολογιστές και συσκευές εξόδου εικόνας (οθόνες, έγχρωμοι εκτυπωτές). Με τη χρήση συνεστιακού μικροσκοπίου σάρωσης λέιζερ, είναι δυνατή η διενέργεια τομογραφίας και απεικόνισης του παρατηρούμενου δείγματος. Επομένως, είναι δυνατή η παρατήρηση και η ανάλυση της τρισδιάστατης χωρικής δομής των κυττάρων χωρίς ζημιές.
Ταυτόχρονα, η ομοεστιακή μικροσκοπία σάρωσης με λέιζερ είναι επίσης ένα ισχυρό εργαλείο για δυναμική παρατήρηση ζωντανών κυττάρων, επισήμανση πολλαπλού ανοσοφθορισμού και επισήμανση ιόντων φθορισμού. Αναλύει με ακρίβεια την ουσία του φάσματος και διακρίνει τα σήματα από διαφορετικές ετικέτες με εξαιρετικά επικαλυπτόμενα φάσματα εκπομπής.
Το πιο σημαντικό πράγμα είναι ότι για πολύχρωμη χρώση φθορισμού, μπορεί να εξαλείψει εντελώς την επίδραση της αλληλεπίδρασης φθορισμού, ελαχιστοποιώντας παράλληλα την απώλεια του σήματος φθορισμού δείγματος. Όλα αυτά είναι πράγματα που οι συνηθισμένοι καθρέφτες δεν μπορούν να επιτύχουν.
Η σχέση εστιακής απόστασης μεταξύ αντικειμενικού μικροσκοπίου και προσοφθάλμιου φακού
Διαφορετικές αρχές
1. Μικροσκόπιο φθορισμού: Χρησιμοποιεί το υπεριώδες φως ως πηγή φωτός για να φωτίσει το αντικείμενο που ελέγχεται, προκαλώντας το να εκπέμπει φθορισμό και, στη συνέχεια, παρατηρεί το σχήμα και τη θέση του αντικειμένου κάτω από το μικροσκόπιο.
2. Συνεστιακό μικροσκόπιο λέιζερ: Με βάση την απεικόνιση μικροσκοπίας φθορισμού, εγκαθίσταται μια συσκευή σάρωσης λέιζερ για να διεγείρει τους ανιχνευτές φθορισμού χρησιμοποιώντας υπεριώδες ή ορατό φως.
Διαφορετικά χαρακτηριστικά
1. Μικροσκόπιο φθορισμού: χρησιμοποιείται για τη μελέτη της απορρόφησης, μεταφοράς, κατανομής και εντοπισμού ουσιών μέσα στα κύτταρα. Ορισμένες ουσίες στα κύτταρα, όπως η χλωροφύλλη, μπορούν να εκπέμπουν φθορισμό μετά την έκθεση τους στην υπεριώδη ακτινοβολία. Ορισμένες ουσίες από μόνες τους μπορεί να μην εκπέμπουν φθορισμό, αλλά εάν χρωματιστούν με φθορίζουσες βαφές ή φθορίζοντα αντισώματα, μπορούν επίσης να εκπέμπουν φθορισμό υπό υπεριώδη ακτινοβολία.
2. Συνεστιακό μικροσκόπιο λέιζερ: Χρήση υπολογιστή για επεξεργασία εικόνας για τη λήψη φθοριζόμενων εικόνων της εσωτερικής μικροδομής των κυττάρων ή των ιστών και για την παρατήρηση φυσιολογικών σημάτων όπως Ca2+, τιμή pH, δυναμικό μεμβράνης και αλλαγές στη μορφολογία των κυττάρων σε υποκυτταρικό επίπεδο.
