Η μέθοδος παρασκευής διαφανειών μικροσκοπίου
1. Μέθοδος επίχρισης
Η μέθοδος επάλειψης είναι μια μέθοδος προετοιμασίας πλακών με ομοιόμορφη επίστρωση υλικών πάνω τους.
Τα υλικά επιχρίσματος περιλαμβάνουν μονοκύτταρους-οργανισμούς, μικρά φύκια, αίμα, βακτηριακά μέσα καλλιέργειας, χαλαρούς ιστούς ζώων και φυτών, όρχεις, ανθήρες κ.λπ.
Κατά την επάλειψη, πρέπει να δίνεται προσοχή:
(1) Η γυάλινη τσουλήθρα πρέπει να καθαριστεί.
(2) Η γυάλινη τσουλήθρα πρέπει να είναι επίπεδη.
(3) Η επίστρωση πρέπει να είναι ομοιόμορφη. Απλώστε το σταγονίδιο στη μέση δεξιά της γυάλινης πλάκας και απλώστε το ομοιόμορφα με λεπίδα ανατομής ή οδοντογλυφίδα.
(4) Η επίστρωση πρέπει να είναι λεπτή. Χρησιμοποιώντας μια άλλη γυάλινη πλάκα ως αντικειμενοφόρο, πιέστε απαλά από τα δεξιά προς τα αριστερά κατά μήκος της επιφάνειας της γυάλινης πλάκας με το εφαρμοσμένο υγρό (η γωνία μεταξύ των δύο πλακών πρέπει να είναι 30 μοίρες έως 45 μοίρες) και εφαρμόστε ένα ομοιόμορφο λεπτό στρώμα.
(5) Διορθώθηκε. Εάν απαιτείται στερέωση, μπορούν να χρησιμοποιηθούν χημικά σταθεροποιητικά ή μέθοδοι ξήρανσης (βακτήρια).
(6) Χρώση. Τα βακτήρια χρησιμοποιούν μπλε του μεθυλενίου και το αίμα χρησιμοποιεί διάλυμα χρώσης Wright. Το διάλυμα χρώσης πρέπει να καλύπτει ολόκληρη την επιφάνεια επίστρωσης.
(7) Ξεπλύνετε. Χρησιμοποιήστε απορροφητικό χαρτί για να απορροφηθεί ή να στεγνώσει.
(8) Σφραγίστε το φιλμ. Μακροχρόνια συντήρηση με καναδική μεμβράνη δέντρων.
2. Μέθοδος πίεσης tablet
Η μέθοδος συμπίεσης είναι μια μέθοδος κοπής βιολογικών υλικών με την τοποθέτησή τους ανάμεσα σε μια γυάλινη πλάκα και ένα κάλυμμα, ασκώντας μια συγκεκριμένη πίεση για να διασκορπιστούν τα κύτταρα των ιστών.
Η γενική διαδικασία της μεθόδου συμπίεσης δισκίων:
(1) Επιλογή υλικού. Για την παρατήρηση της κυτταρικής διαίρεσης, ως υλικά θα πρέπει να επιλέγονται κύτταρα φρέσκου ιστού με έντονη κυτταρική διαίρεση. Όπως το άκρο της ρίζας, το μερίστωμα του στελέχους, τα κύτταρα του μυελού των οστών, οι ανθήρες (μητρικά κύτταρα γύρης). Φωλιές σπέρματος (σπερματοκύτταρα) κ.λπ.
(2) Διορθώθηκε. Η στερέωση υλικού μπορεί να προσδιοριστεί ανάλογα με τις ανάγκες και το δείγμα πρέπει να συμπιεστεί και να παρατηρηθεί αμέσως. Δεν είναι απαραίτητο να πραγματοποιηθεί ξεχωριστή θεραπεία στερέωσης (σύγχρονη με τη χρώση). Εάν το υλικό δεν επιθεωρηθεί αμέσως μετά τη δειγματοληψία, μπορεί να στερεωθεί με σταθεροποιητικό (συνήθως σταθεροποιητικό αλκοόλης οξικού οξέος). Μετά τη στερέωση για 2-24 ώρες (ανάλογα με το υλικό), ξεπλύνετε με αιθανόλη 95% και αποθηκεύστε σε αιθανόλη 70% για μελλοντική χρήση.
(3) Διαχωρισμός. Υλικά που δεν διασπείρονται εύκολα από τα κύτταρα θα πρέπει να υποβάλλονται σε επεξεργασία με διάλυμα διαχωρισμού υδρόλυσης (όπως HCl 1Ν ή σπέρμα υδροχλωρικού οξέος) για 6-20 λεπτά. Μετά τη διάσπαση, πρέπει να ξεπλένονται με νερό πριν από τη χρώση.
(4) Χρώση. Υπάρχουν πολλά είδη βαφών. Τα χρωμοσώματα συνήθως χρωματίζονται με διάλυμα χρώσης οξικού οξέος ματζέντα.
(5) Πατήστε το tablet. Τοποθετήστε το υλικό σε μια γυάλινη πλάκα, προσθέστε μια σταγόνα νερό ή διάλυμα βαφής, καλύψτε τη διαφάνεια με ένα κάλυμμα και πιέστε την απαλά με τον αντίχειρά σας.
(6) Παρατηρήστε. Μετά τη συμπίεση, μπορεί να παρατηρηθεί με μικροσκόπιο.
