Χρήση μικροσκοπίας φθορισμού: Τεχνικές και δεξιότητες
Τεχνικές παράμετροι μικροσκοπίου φθορισμού 1. Προσοφθάλμιο ευρυγώνιο 2. Αχρωμικός αντικειμενικός φακός 3. Μετατροπέας αντικειμενικού φακού τεσσάρων οπών 4. Συσκευή επιφθορισμού Μπλε (Β) Πράσινο (G) σύστημα διέγερσης 10Λαμπτήρας υδραργύρου 0W 5. Ομοαξονικός μηχανισμός ρύθμισης χονδρικής και λεπτής εστίασης: προσαρμογή Εύρος εστίασης: 15 mm Τιμή πλέγματος μικροκίνησης: 0,002 mm 6. Μηχανικό τραπέζι διπλής στρώσης Εύρος διαμήκους κίνησης: 70 mm Εύρος πλευρικής κίνησης: 50 mm
Χρησιμοποιήστε τη μέθοδο δεξιοτήτων
(1) Γυάλινη τσουλήθρα
Το πάχος της γυάλινης διαφάνειας πρέπει να είναι μεταξύ 0,8 και 1,2 mm. Μια διαφάνεια που είναι πολύ παχιά θα απορροφήσει περισσότερο φως αφενός και, αφετέρου, το φως διέγερσης δεν μπορεί να συγκεντρωθεί στο δείγμα. Οι πλάκες πρέπει να είναι λείες, ομοιόμορφες σε πάχος και απαλλαγμένες από εμφανή αυτοφθορισμό. Μερικές φορές χρησιμοποιούνται διαφάνειες από γυαλί χαλαζία.
(2) Γυαλί καλύμματος
Το πάχος του γυαλιού καλύμματος είναι περίπου 0.17 mm, λείο. Προκειμένου να ενισχυθεί το φως διέγερσης, μπορεί επίσης να χρησιμοποιηθεί ένα γυαλί κάλυψης παρεμβολής, το οποίο είναι ένα ειδικό γυαλί επικάλυψης επικαλυμμένο με πολλά στρώματα ουσιών (όπως το φθοριούχο μαγνήσιο) που έχουν διαφορετικές επιδράσεις παρεμβολής στο φως διαφορετικών μηκών κύματος, το οποίο μπορεί να κάνει ο φθορισμός πάει ομαλά. Το συναρπαστικό φως διέρχεται και ανακλάται, και αυτό το ανακλώμενο φως διέγερσης διεγείρει το δείγμα.
(3) Δείγμα
Οι φέτες ιστού ή άλλα δείγματα δεν πρέπει να είναι πολύ παχιά. Εάν είναι πολύ παχύ, το μεγαλύτερο μέρος του φωτός διέγερσης θα καταναλωθεί στο κάτω μέρος του δείγματος, ενώ το πάνω μέρος που παρατηρείται άμεσα από τον αντικειμενικό φακό δεν θα διεγείρεται πλήρως. Επιπλέον, η επικάλυψη κυττάρων ή η κάλυψη ακαθαρσιών, επηρεάζουν την κρίση.
(4) Στήριγμα
Η γλυκερίνη χρησιμοποιείται συνήθως ως μέσο στερέωσης, το οποίο δεν πρέπει να έχει αυτοφθορισμό, άχρωμο και διαφανές και η φωτεινότητα του φθορισμού είναι πιο φωτεινή σε pH 8.5-9.5 και δεν είναι εύκολο να εξασθενίσει γρήγορα. Ως εκ τούτου, ένα ίσο μείγμα γλυκερόλης και ρυθμιστικού διαλύματος ανθρακικού 0,5 mol/l με pH 9.0 έως 9,5 χρησιμοποιείται συνήθως ως παράγοντας στερέωσης.
(5) λάδι καθρέφτη
Γενικά, κατά την παρατήρηση δειγμάτων με μικροσκόπια φθορισμού σκοτεινού πεδίου και φακούς εμβάπτισης λαδιού, πρέπει να χρησιμοποιείται λάδι εμβάπτισης. Είναι καλύτερο να χρησιμοποιείτε ειδικό μη φθορίζον λάδι εμβάπτισης. Η παραπάνω γλυκερίνη μπορεί επίσης να χρησιμοποιηθεί αντ 'αυτού και μπορεί επίσης να χρησιμοποιηθεί υγρή παραφίνη, αλλά ο δείκτης διάθλασης είναι χαμηλός, γεγονός που επηρεάζει ελαφρά την ποιότητα της εικόνας. Επιρροή.
