Γιατί η μεγέθυνση ενός φακού λαδιού είναι μεγαλύτερη από αυτή ενός συνηθισμένου αντικειμενικού φακού;
Λόγοι για τους οποίους τα βακτήρια πρέπει να διορθωθούν πριν από τη χρώση σε μικροβιολογικά πειράματα:
1: Σκοτώστε τα κύτταρα και κάντε τη βαφή να χρωματίζεται εύκολα.
Δεύτερο: Κάντε τα βακτήρια να προσκολληθούν στη γυάλινη πλάκα και να μην ξεπλένονται εύκολα από το νερό.
Κατά τη στερέωση, στεγνώστε αργά. Εάν θέλετε πραγματικά να επιταχύνετε τη διαδικασία, μπορείτε να το στεγνώσετε για μερικές φορές σε απόσταση πάνω από τη φλόγα μιας λάμπας αλκοόλης. Μην στεγνώνετε το γυαλί ώστε να ζεσταθεί, διαφορετικά μπορεί να καταστρέψει τη βακτηριακή μορφή ζωής.
Χρώση κατά Gram και μικροσκοπική παρατήρηση βακτηρίων
Πειραματική αρχή
Αρχή της χρώσης κατά Gram: Οι διαφορετικές αντιδράσεις των βακτηρίων στη χρώση κατά Gram οφείλονται στη διαφορετική σύνθεση και δομή των κυτταρικών τοιχωμάτων τους. Το κυτταρικό τοίχωμα των Gram-θετικών βακτηρίων είναι κυρίως ένα δίκτυο πεπτιδογλυκανών. Όταν υποβάλλεται σε επεξεργασία με αιθανόλη, το μέγεθος των πόρων της δομής του δικτύου γίνεται μικρότερο λόγω της αφυδάτωσης και η διαπερατότητα μειώνεται, προκαλώντας έτσι το σχηματισμό του συμπλέγματος κρυσταλλικής βιολέτας-ιωδίου. Η ουσία δεν εκλούεται εύκολα και παραμένει στα κύτταρα. Μετά τον αποχρωματισμό και την αντιχρώση, το μπλε-μοβ χρώμα της κύριας βαφής εξακολουθεί να διατηρείται. Το στρώμα πεπτιδογλυκάνης του κυτταρικού τοιχώματος των Gram-αρνητικών βακτηρίων είναι λεπτή και έχει υψηλή περιεκτικότητα σε λιπίδια. Επομένως, κατά τη διάρκεια του αποχρωματισμού, τα λιπίδια διαλύονται με αιθανόλη (ή ακετόνη) και η διαπερατότητα του κυτταρικού τοιχώματος αυξάνεται, καθιστώντας το σύμπλοκο κρυσταλλικής βιολέτας-ιωδίου είναι σχετικά εύκολο να εκλουσθεί. Μετά την αντιχρώση με αντιχρώση, οι κυψέλες βάφονται με το κόκκινο χρώμα της αντιχρώσης. Αρχή της απεικόνισης με μικροσκόπιο: Τα σύγχρονα συνηθισμένα οπτικά μικροσκόπια χρησιμοποιούν δύο συστήματα φακών, προσοφθάλμιους φακούς και αντικειμενικούς φακούς, για να μεγεθύνουν τις εικόνες, επομένως ονομάζονται συχνά σύνθετα μικροσκόπια. Στο οπτικό σύστημα ενός μικροσκοπίου, η απόδοση του αντικειμενικού φακού είναι η πιο κρίσιμη. Ο φακός λαδιού έχει τη μεγαλύτερη μεγέθυνση και είναι ο πιο σημαντικός για τη μικροβιολογική έρευνα. Ο κύριος σκοπός της προσθήκης σταγόνων λαδιού φακού μεταξύ της πλάκας και του φακού είναι να αυξηθεί η φωτεινότητα του φωτισμού και να αυξηθεί η ανάλυση του μικροσκοπίου. Η χρήση λαδιού αντί για αέρα ως μέσο διάδοσης του φωτός μειώνει τη διάθλαση ή την ολική ανάκλαση του φωτός, καθιστώντας την παρατηρούμενη εικόνα πιο καθαρή.
Αναζητήστε τις βακτηριακές αποικίες που πρέπει να παρατηρηθούν κάτω από ένα μικροσκόπιο χαμηλής μεγέθυνσης (συνεχίστε να κινείτε τη διαφάνεια, εάν αισθάνεστε μια κόκκινη σκιά, σταματήστε αμέσως, ρυθμίστε τη μεγέθυνση, εάν δεν είναι αποικία, συνεχίστε να κοιτάζετε), σηκώστε το βαρέλι του φακού , και μετά μεταβείτε στο φακό λαδιού. Προσθέστε μια σταγόνα λάδι κέδρου στην περιοχή του δείγματος και χρησιμοποιήστε τον χονδρό ρυθμιστή για να χαμηλώσετε προσεκτικά το βαρέλι του φακού, έτσι ώστε ο φακός λαδιού να βυθιστεί στο λάδι του φακού και σχεδόν σε επαφή με το δείγμα. Σηκώστε τον συμπυκνωτή στην υψηλότερη θέση και ανοίξτε το άνοιγμα. Χρησιμοποιήστε τον χονδρό ρυθμιστή για να σηκώσετε αργά την κάννη του φακού μέχρι να εμφανιστεί η εικόνα του αντικειμένου στο οπτικό πεδίο και χρησιμοποιήστε τον λεπτό ρυθμιστή για να την κάνετε καθαρή και εστιασμένη.
