Τα μικροσκόπια φθορισμού ταξινομούνται σε δύο τύπους με βάση την οπτική τους διαδρομή:
1. Μικροσκόπιο φθορισμού μετάδοσης: Η πηγή φωτός διέγερσης χρησιμοποιείται για τη διέγερση του φθορισμού περνώντας μέσα από το υλικό του δείγματος μέσω ενός φακού συμπυκνωτή. Μπορούν επίσης να χρησιμοποιηθούν κοινώς χρησιμοποιούμενοι συγκεντρωτές σκοτεινού πεδίου και μπορούν να χρησιμοποιηθούν συνηθισμένοι συγκεντρωτές για να ρυθμίσουν τον ανακλαστήρα ώστε να ανακατευθύνει και να πλευρίσει το φως διέγερσης στο δείγμα. Αυτό είναι ένα σχετικά παλιό-μοδάτο μικροσκόπιο φθορισμού. Το πλεονέκτημά του είναι ο ισχυρός φθορισμός σε χαμηλή μεγέθυνση, αλλά το μειονέκτημά του είναι ότι ο φθορισμός του μειώνεται με την αύξηση της μεγέθυνσης. Επομένως, είναι καλύτερο για την παρατήρηση μεγαλύτερων υλικών δειγμάτων.
2. Το μικροσκόπιο φθορισμού φωτός πτώσης είναι ένας νέος τύπος μικροσκοπίου φθορισμού που αναπτύχθηκε στη σύγχρονη εποχή. Σε αντίθεση με τα παραπάνω, το φως διέγερσης πέφτει από τον αντικειμενικό φακό προς τα κάτω στην επιφάνεια του δείγματος, χρησιμοποιώντας τον ίδιο αντικειμενικό φακό με τον συμπυκνωτή φωτισμού και τον αντικειμενικό φακό για τη συλλογή του φθορισμού. Πρέπει να προστεθεί ένας διαχωριστής δέσμης διπλού χρώματος στην οπτική διαδρομή, η οποία απέχει 45 μοίρες από το ελαφρύ ουράνιο. Γωνία, το φως διέγερσης αντανακλάται στον αντικειμενικό φακό και εστιάζεται στο δείγμα. Ο φθορισμός που δημιουργείται από το δείγμα, καθώς και το φως διέγερσης που ανακλάται από την επιφάνεια του αντικειμενικού φακού και του γυαλιού καλύμματος, εισέρχονται στον αντικειμενικό φακό και επιστρέφουν στον διαχωριστή διπλής δέσμης χρώματος, διαχωρίζοντας το φως διέγερσης και τον φθορισμό. Το υπολειπόμενο φως διέγερσης στη συνέχεια απορροφάται από το φίλτρο μπλοκαρίσματος. Εάν χρησιμοποιούνται διαφορετικοί συνδυασμοί φίλτρων διέγερσης/διαχωριστών δέσμης διπλού χρώματος/φίλτρων αποκλεισμού, μπορούν να καλύψουν τις ανάγκες διαφορετικών προϊόντων αντίδρασης φθορισμού. Τα πλεονεκτήματα αυτού του μικροσκοπίου φθορισμού είναι ο ομοιόμορφος φωτισμός πεδίου, η καθαρή απεικόνιση και ο ισχυρότερος φθορισμός με μεγαλύτερη μεγέθυνση.
(2) Οδηγίες χρήσης μικροσκοπίου φθορισμού
1. Ενεργοποιήστε την πηγή φωτός. Η λυχνία υδραργύρου εξαιρετικά{2}}υψηλής πίεσης πρέπει να προθερμανθεί για λίγα λεπτά για να φτάσει στη μέγιστη φωτεινότητά της.
2. Το μικροσκόπιο φθορισμού μετάδοσης απαιτεί την εγκατάσταση του απαιτούμενου φίλτρου διέγερσης μεταξύ της πηγής της λυχνίας και του συμπυκνωτή και του αντίστοιχου φίλτρου μπλοκαρίσματος πίσω από τον αντικειμενικό φακό. Το μικροσκόπιο φθορισμού πέφτοντος φωτός πρέπει να εισάγει το απαιτούμενο φίλτρο διέγερσης/διαιρέτη διπλής δέσμης χρώματος/μπλοκ φίλτρου αποκλεισμού στην υποδοχή της οπτικής διαδρομής.
3. Παρατηρήστε με μικροσκόπιο-χαμηλής ισχύος και ρυθμίστε το κέντρο της πηγής φωτός σύμφωνα με τη συσκευή ρύθμισης διαφορετικών τύπων μικροσκοπίων φθορισμού, έτσι ώστε να βρίσκεται στο κέντρο ολόκληρου του σημείου φωτισμού.
4. Τοποθετήστε το δείγμα και εστιάστε το για παρατήρηση. Πρέπει να δίνεται προσοχή κατά τη χρήση: Μην παρατηρείτε απευθείας με τα μάτια σας πριν εγκαταστήσετε το φίλτρο για να αποφύγετε τη βλάβη στα μάτια. Κατά την παρατήρηση δειγμάτων με μικροσκόπιο λαδιού, πρέπει να χρησιμοποιείται ειδικό μικροσκόπιο μη φθορίζοντος λαδιού. Αφού σβήσει η λυχνία υδραργύρου υψηλής-πίεσης, δεν μπορεί να ανάψει ξανά αμέσως. Χρειάζονται 5 λεπτά για να επανεκκινηθεί, διαφορετικά θα είναι ασταθές και θα επηρεάσει τη διάρκεια ζωής της λάμπας υδραργύρου.
(3) Παρατηρώντας κάτω από ένα μικροσκόπιο φθορισμού σε μια πλατφόρμα διδασκαλίας χρησιμοποιώντας ένα φίλτρο μπλε ιώδους φωτός, μπορούν να φανούν κύτταρα βαμμένα με φθορίζουσα χρωστική πορτοκαλί ακριδίνης 0,01%. Ο πυρήνας και το κυτταρόπλασμα διεγείρονται για να παράγουν δύο διαφορετικά χρώματα φθορισμού (σκούρο πράσινο και πορτοκαλί κόκκινο).
