Λειτουργίες κάθε φίλτρου σε μικροσκόπιο φθορισμού
Το πιο κρίσιμο ζήτημα με τη μικροσκοπία φθορισμού είναι ο συνδυασμός οπτικών φίλτρων. Τόσο το φίλτρο διέγερσης όσο και το φίλτρο θωράκισης πρέπει να είναι κατάλληλα για το παρατηρούμενο φθορίζον υλικό και να ταιριάζουν μεταξύ τους. Για ορισμένες συγκεκριμένες εφαρμογές, εάν υπάρχουν σφάλματα στην επιλογή φίλτρων, μπορεί να οδηγήσουν σε παρεξηγήσεις και ακόμη και λανθασμένα αποτελέσματα. Τα επιτεύγματα της τεχνολογίας μικροσκοπίας φθορισμού είναι αδιαχώριστα από τα φίλτρα υψηλής-ποιότητας και τις έξυπνα ταιριασμένες ομάδες φίλτρων. Υπάρχουν διάφοροι τύποι φίλτρων για μικροσκοπία φθορισμού.
1. Φίλτρο απορρόφησης θερμότητας
Το φίλτρο απορρόφησης θερμότητας είναι ένα απαραίτητο φίλτρο για την πρόληψη της θερμικής ακτινοβολίας στο φάσμα της πηγής φωτός από το να βλάψει το οπτικό σύστημα. Τα πρώιμα προηγμένα μικροσκόπια ήταν εξοπλισμένα με μπουκάλια σε σχήμα τυμπάνου που μπορούσαν να κρατήσουν απεσταγμένο νερό ως συσκευές απορρόφησης θερμότητας. Τα σύγχρονα ερευνητικά μικροσκόπια μεγάλης-κλίμακας είναι εξοπλισμένα με γυάλινα φίλτρα απορρόφησης θερμότητας σε φωτεινά κουτιά πηγής φωτός ή θαλάμους λαμπτήρων, τα οποία είναι διαφανή και ελαφρώς κίτρινα γυάλινα φύλλα. Τα φίλτρα KG1 (2 mm) και BG38 (4 mm) της Leitz μπορούν να μεταδώσουν σχεδόν όλα τα φάσματα υπεριώδους και ορατού φωτός, με ρυθμό μετάδοσης φωτός έως και 98%. Απορροφά μόνο επιλεκτικά υπέρυθρη φωτοθερμική ακτινοβολία.
2. Φίλτρο διέγερσης
Τα φίλτρα διέγερσης μπορούν επιλεκτικά να απορροφήσουν φασματικές γραμμές μεγάλου μήκους κύματος και να μεταδώσουν μόνο υπεριώδες φως. Τα φίλτρα μοβ, μπλε και πράσινου φωτός είναι φίλτρα διέγερσης. Zeiss, Reichert, σειρά B Olympus, σειρά G, σειρά BG, σειρά UG της Shott, σειρά H, G, BP της Opton, σειρά BP της Leitz και άλλα οπτικά φίλτρα είναι όλα φίλτρα διέγερσης.
3. Φίλτρο μπλοκαρίσματος
Ένα φίλτρο μπλοκαρίσματος είναι ένα φίλτρο που απορροφά επιλεκτικά φασματικές γραμμές μικρού μήκους και υπέρυθρες ακτίνες, ενώ επιτρέπει τη θέαση μεγαλύτερων κυμάτων. Η λειτουργία του είναι να επιτρέπει στον παρατηρητή να βλέπει τον φθορισμό που διεγείρεται από το αντικείμενο που επιθεωρείται, ενώ προστατεύει τον κερατοειδή του παρατηρητή από βλάβες στην υπεριώδη ακτινοβολία.
4. Φίλτρο διαχωρισμού χρωμάτων
Το φίλτρο διαχωρισμού χρωμάτων είναι ένας καθρέφτης φίλτρου που αντανακλά το φως διέγερσης στο αντικείμενο που επιθεωρείται, αναγκάζοντας το αντικείμενο να εκπέμπει φθορισμό και στη συνέχεια μεταδίδει τον φθορισμό στον προσοφθάλμιο φακό. Αυτός ο τύπος φίλτρου μπορεί να χρησιμοποιηθεί μόνο σε συμπυκνωτή πτώσης φωτός, ενώ ένα μικροσκόπιο φθορισμού εκπεμπόμενου φωτός δεν απαιτεί διαχωρισμό χρωμάτων.
5. Φίλτρο παρεμβολών
Το φίλτρο παρεμβολής είναι ένας τύπος-φίλτρου διέγερσης υψηλής απόδοσης. Είναι ένα φίλτρο που κατασκευάζεται με τη στοίβαξη πολλών λεπτών μεταλλικών μεμβρανών ανάμεσα σε δύο γυαλισμένα φύλλα γυαλιού. Ο δείκτης διάθλασης κάθε λεπτού μεταλλικού φιλμ είναι διαφορετικός, επομένως οι φασματικές γραμμές διαφόρων μηκών κύματος της φωτεινής πηγής φωτισμού ανακλώνται επανειλημμένα σε κάθε μεταλλικό φιλμ. Ορισμένες φασματικές γραμμές ορισμένων μηκών κύματος ακυρώνονται από καταστροφικές παρεμβολές, ενώ άλλες ενισχύονται από προσθετική παρεμβολή και μεταδίδονται μέσω. Αυτό έχει ως αποτέλεσμα ένα φίλτρο με στενό φάσμα μετάδοσης και μισό πλάτος κορυφής μόνο 6-20 nm. Η μετάδοση μπορεί να φτάσει το 60% -70%.
