Πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα της μικροσκοπίας σάρωσης με λέιζερ πολλαπλών φωτονίων
Η μικροσκοπία σάρωσης λέιζερ πολλαπλών φωτονίων είναι μια πειραματική μέθοδος που βασίζεται στην τεχνολογία μικροσκοπίας σάρωσης με λέιζερ που παρέχει πιο ακριβείς δυνατότητες οπτικής τομής στην προβολή 3D. Η μέθοδος διέγερσης φθορισμού πολλαπλών φωτονίων χρησιμοποιεί μεγάλα μήκη κύματος κόκκινου ή κοντινού υπέρυθρου φωτός για τη λήψη υψηλής ανάλυσης φθορίζουσες εικόνες δειγμάτων με ελάχιστη θανάτωση ενεργών δειγμάτων, καθιστώντας την κατάλληλη για απεικόνιση ζωντανών κυττάρων, ιδιαίτερα παχύτερων ζωντανών ιστών όπως φέτες εγκεφάλου, έμβρυα. ολόκληρα όργανα και ακόμη και ολόκληροι οργανισμοί.
Τα πλεονεκτήματα είναι τα εξής:
1, η χρήση του κόκκινου φωτός ή της διέγερσης υπέρυθρου φωτός, η σκέδαση φωτός είναι μικρή (η σκέδαση των μικρών σωματιδίων και το μήκος κύματος της τέταρτης ισχύος της αντίστροφης αναλογίας).
2, δεν απαιτεί τρύπα καρφίτσας, μπορεί να συλλέξει περισσότερα διάσπαρτα φωτόνια από τη διατομή απεικόνισης.
3, η οπή καρφίτσας δεν μπορεί να διακρίνει μεταξύ των σκεδασμένων φωτονίων που εκπέμπονται από την περιοχή εκτός εστίασης ή την εστιακή περιοχή, η αναλογία σήματος προς θόρυβο σε βάθος εικόνας πολλαπλών φωτονίων είναι καλή.
4, διέγερση ενός φωτονίου υπεριώδους ή ορατού φωτός που χρησιμοποιείται στη δέσμη για να φτάσει στο εστιακό επίπεδο πριν το δείγμα απορροφηθεί και εξασθενήσει εύκολα, δεν είναι εύκολη έως βαθιά διέγερση.
5, στην παρατήρηση του βιολογικού μικροσκοπίου, * η πρώτη σκέψη είναι να μην βλάψει την ενεργή κατάσταση του ίδιου του οργανισμού, να διατηρήσει το νερό, τη συγκέντρωση ιόντων, την κυκλοφορία οξυγόνου και θρεπτικών ουσιών. Σε περιπτώσεις παρατήρησης φωτός, τόσο η θερμική ενέργεια όσο και η ενέργεια των φωτονίων πρέπει να παραμένουν στο κύτταρο χωρίς ζημιά στην ποσότητα της ακτινοβολίας, της φωτεινής ενέργειας.
6, το μικροσκόπιο πολλαπλών φωτονίων έχει επίσης πολλά πλεονεκτήματα. Όπως η τρισδιάστατη ανάλυση, η διείσδυση βάθους, η απόδοση σκέδασης, το φως φόντου, η αναλογία σήματος προς θόρυβο, έλεγχος κ.λπ., υπάρχουν προηγούμενα μικροσκόπια λέιζερ που δεν έχουν ή έχουν ασύγκριτα πέρα από τα χαρακτηριστικά.
Το πολυφωτονικό ομοεστιακό μικροσκόπιο σάρωσης λέιζερ έχει επεκταθεί σε διάφορα πεδία έρευνας και εφαρμογής. Είναι ικανό για τρισδιάστατη μη καταστροφική παρατήρηση δειγμάτων στη φυσική τους κατάσταση και μπορεί να βελτιώσει την ανάλυση και την αναλογία σήματος προς θόρυβο του συστήματος. Χρησιμοποιώντας την αλλαγή των ιδιοτήτων του υλικού μετά από διέγερση πολλαπλών φωτονίων, είναι επίσης δυνατό να επιτευχθεί τρισδιάστατη αποθήκευση δεδομένων ύψους και τρισδιάστατη μικροκατασκευή προς οποιαδήποτε κατεύθυνση, η οποία έχει υψηλή τιμή εφαρμογής. Μπορούμε να πιστέψουμε ότι με την περαιτέρω ανάπτυξη μηχανημάτων, υλικών, τεχνολογίας λέιζερ και άλλων τεχνολογιών που σχετίζονται με την πολυφωτονική ομοεστιακή μικροσκοπία, το πολυφωτονικό ομοεστιακό μικροσκόπιο σάρωσης λέιζερ θα είναι μεγαλύτερη ανάπτυξη και ευρύτερη εφαρμογή.
Τα μειονεκτήματα είναι τα εξής:
1, μόνο απεικόνιση φθορισμού.
2, εάν το δείγμα περιλαμβάνει χρωμοφόρα που μπορούν να απορροφήσουν το φως διέγερσης, όπως χρωστικές, το δείγμα μπορεί να υποστεί θερμική βλάβη.
3, η ανάλυση είναι ελαφρώς μειωμένη, αν και μπορεί να βελτιωθεί με την ταυτόχρονη χρήση ομοεστιακού διαφράγματος, αλλά θα υπάρξει απώλεια σήματος.
4. Το κόστος της πολυφωτονικής μικροσκοπίας σάρωσης είναι υψηλό λόγω του περιορισμού των ακριβών υπερταχέων λέιζερ.
