Πλεονεκτήματα και περιορισμοί των μικροσκοπίων σάρωσης με λέιζερ πολλαπλών φωτονίων
Τα πλεονεκτήματα είναι τα εξής:
1. Διεγερμένη από το κόκκινο ή το υπέρυθρο φως, η σκέδαση του φωτός είναι μικρή (η σκέδαση των μικρών σωματιδίων είναι αντιστρόφως ανάλογη με την τέταρτη δύναμη του μήκους κύματος).
2. Δεν χρειάζονται τρύπες καρφίτσας, ικανές να συλλέγουν περισσότερα διάσπαρτα φωτόνια από τη διατομή-εικόνων.
3. Οι τρύπες δεν μπορούν να διακρίνουν τα διάσπαρτα φωτόνια που εκπέμπονται από περιοχές αποεστίασης ή εστίασης και τα πολυφωτόνια έχουν καλύτερη αναλογία σήματος-προς-θόρυβο σε βαθιά απεικόνιση.
4. Το υπεριώδες ή ορατό φως που χρησιμοποιείται για τη διέγερση ενός φωτονίου απορροφάται εύκολα και εξασθενεί από το δείγμα πριν η δέσμη φτάσει στο εστιακό επίπεδο, καθιστώντας δύσκολη τη διέγερση των βαθιών στρωμάτων.
5. Όσον αφορά την παρατήρηση με βιολογικό μικροσκόπιο, η πρώτη σκέψη είναι να μην βλάψει την ενεργή κατάσταση του ίδιου του οργανισμού και να διατηρήσει την κυκλοφορία του νερού, τη συγκέντρωση ιόντων, το οξυγόνο και τα θρεπτικά συστατικά. Στο πεδίο της παρατήρησης φωτός, τόσο η θερμική ενέργεια όσο και η ενέργεια των φωτονίων πρέπει να παραμένουν εντός της δόσης ακτινοβολίας και η φωτεινή ενέργεια που δεν καταστρέφει τα κύτταρα.
6. Η πολυφωτονική μικροσκοπία έχει επίσης πολλά πλεονεκτήματα. Όσον αφορά την τριδιάστατη ανάλυση, την εισβολή βάθους, την αποτελεσματικότητα σκέδασης, το φως φόντου, την αναλογία σήματος προς-θόρυβο, τον έλεγχο κ.λπ., τα μικροσκόπια λέιζερ έχουν απαράμιλλα ή ανώτερα χαρακτηριστικά που δεν είχαν τα προηγούμενα μικροσκόπια λέιζερ.
Το πολυφωτονικό ομοεστιακό μικροσκόπιο σάρωσης λέιζερ έχει επεκταθεί σε διάφορα πεδία έρευνας και εφαρμογής. Μπορεί να εκτελέσει τρισδιάστατη μη-παρατήρηση σε δείγματα στη φυσική τους κατάσταση και να βελτιώσει την ανάλυση και την αναλογία σήματος προς{3}}θόρυβο του συστήματος χρησιμοποιώντας τις αλλαγές στις ιδιότητες του υλικού μετά την αποθήκευση των τριών διαστάσεων και των πολλαπλών φόνων μπορεί επίσης να επιτευχθεί τρισδιάστατη μικροκατασκευή προς οποιαδήποτε κατεύθυνση, η οποία έχει υψηλή αξία εφαρμογής. Μπορεί να πιστεύεται ότι με την περαιτέρω ανάπτυξη μηχανικών, υλικών και τεχνολογιών λέιζερ που σχετίζονται με την πολυφωτονική ομοεστιακή μικροσκοπία, η πολυφωτονική ομοεστιακή μικροσκοπία σάρωσης λέιζερ θα έχει μεγαλύτερη ανάπτυξη και ευρύτερες εφαρμογές
Τα μειονεκτήματα είναι τα εξής:
1. Μόνο για απεικόνιση φθορισμού.
2. Εάν το δείγμα περιλαμβάνει χρωμοφόρα που μπορούν να απορροφήσουν το φως διέγερσης, όπως χρωστικές, το δείγμα μπορεί να υποστεί θερμική βλάβη.
3. Η ανάλυση είναι ελαφρώς μειωμένη, αν και μπορεί να βελτιωθεί με την ταυτόχρονη χρήση ομοεστιακών μικρών οπών, θα υπάρξει απώλεια σήματος.
4. Λόγω των περιορισμών των ακριβών υπερταχέων λέιζερ, το κόστος των μικροσκοπίων σάρωσης πολλαπλών φωτονίων είναι σχετικά υψηλό.
