Δύο κοινά εφαρμοσμένες προσεγγίσεις παρατήρησης για μικροσκόπια
1, Παρατήρηση σκοτεινού πεδίου
Το σκοτεινό οπτικό πεδίο είναι στην πραγματικότητα φωτισμός σκοτεινού πεδίου Τα χαρακτηριστικά του διαφέρουν από το φωτεινό οπτικό πεδίο, καθώς δεν παρατηρεί απευθείας το φωτιζόμενο φως, αλλά παρατηρεί το ανακλώμενο ή διαθλασμένο φως του αντικειμένου που επιθεωρείται. Επομένως, το οπτικό πεδίο γίνεται σκούρο φόντο, ενώ το αντικείμενο που επιθεωρείται παρουσιάζει μια φωτεινή εικόνα
Η αρχή του σκοτεινού πεδίου βασίζεται στο οπτικό φαινόμενο Tyndall, όπου τα σωματίδια σκόνης δεν μπορούν να παρατηρηθούν από το ανθρώπινο μάτι όταν εκτίθενται σε ισχυρό φως λόγω της περίθλασης που προκαλείται από το ισχυρό φως.
Το ειδικό εξάρτημα που απαιτείται για την παρατήρηση σκοτεινού πεδίου είναι ένας προβολέας σκοτεινού πεδίου. Χαρακτηριστικό του είναι ότι δεν επιτρέπει στη δέσμη φωτός να περάσει μέσα από το αντικείμενο από κάτω προς τα πάνω, αλλά αλλάζει τη διαδρομή του φωτός για να κατευθύνεται λοξά προς το αντικείμενο, έτσι ώστε το φως φωτισμού να μην εισέρχεται απευθείας στον αντικειμενικό φακό και χρησιμοποιεί τη φωτεινή εικόνα που σχηματίζεται από την ανάκλαση ή τη μεγαλύτερη ανάλυση του πεδίου φωτός. από αυτό της παρατήρησης φωτεινού πεδίου, φτάνοντας μέχρι και 0,02-0,004
2, μέθοδος επιθεώρησης καθρέφτη αντίθεσης φάσης
Η επιτυχημένη εφεύρεση της μικροσκοπίας αντίθεσης φάσης στην ανάπτυξη οπτικών μικροσκοπίων είναι ένα σημαντικό επίτευγμα στη σύγχρονη τεχνολογία μικροσκοπίας Γνωρίζουμε ότι το ανθρώπινο μάτι μπορεί να διακρίνει μόνο το μήκος κύματος (χρώμα) και το πλάτος (φωτεινότητα) των κυμάτων φωτός. Για άχρωμα και διαφανή βιολογικά δείγματα, όταν το φως διέρχεται, το μήκος κύματος και το πλάτος δεν αλλάζουν πολύ, καθιστώντας δύσκολη την παρατήρηση του δείγματος σε φωτεινό πεδίο
Το μικροσκόπιο αντίθεσης φάσης χρησιμοποιεί τη διαφορά στο μήκος της οπτικής διαδρομής του αντικειμένου που επιθεωρείται για επιθεώρηση καθρέφτη, χρησιμοποιώντας αποτελεσματικά το φαινόμενο παρεμβολής του φωτός για να μετατρέψει τη διαφορά φάσης που δεν μπορεί να διακριθεί από το ανθρώπινο μάτι σε μια διακριτή διαφορά πλάτους. Ακόμη και άχρωμες και διαφανείς ουσίες μπορούν να γίνουν καθαρά ορατές Αυτό διευκολύνει πολύ την παρατήρηση των ζωντανών κυττάρων, επομένως η μικροσκοπία αντίθεσης φάσης χρησιμοποιείται ευρέως σε ανεστραμμένα μικροσκόπια
Η βασική αρχή της μικροσκοπίας αντίθεσης φάσης είναι να μετατρέπει τη διαφορά οπτικής διαδρομής του ορατού φωτός που διέρχεται από το δείγμα σε διαφορά πλάτους, βελτιώνοντας έτσι την αντίθεση μεταξύ των διαφόρων δομών και καθιστώντας τις σαφείς και ορατές Αφού περάσει από το δείγμα, το φως υφίσταται διάθλαση, αποκλίνοντας από την αρχική οπτική διαδρομή και καθυστερώντας κατά 1/4 λ. Εάν η διαφορά οπτικής διαδρομής αυξηθεί ή μειωθεί κατά άλλο 1/4 λ, η διαφορά οπτικής διαδρομής γίνεται 1/2 λ και η παρεμβολή μεταξύ των δύο ακτίνων φωτός αυξάνεται ή μειώνεται μετά τον συνδυασμό του άξονα, βελτιώνοντας την αντίθεση Από άποψη δομής, τα μικροσκόπια αντίθεσης φάσης έχουν δύο ειδικές διαφορές από τα συνηθισμένα οπτικά μικροσκόπια:
1. Ένα δακτυλιοειδές διάφραγμα βρίσκεται μεταξύ της πηγής φωτός και του συμπυκνωτή και η λειτουργία του είναι να σχηματίζει έναν κοίλο κώνο φωτός που περνά μέσα από τον συμπυκνωτή και εστιάζει στο δείγμα
2. Πλάκα γωνιακής φάσης: Μια πλάκα φάσης επικαλυμμένη με φθοριούχο μαγνήσιο προστίθεται στον αντικειμενικό φακό, η οποία μπορεί να καθυστερήσει τη φάση του άμεσου ή περιθλαμένου φωτός κατά 1/4 λ. Μπορεί να χωριστεί σε δύο τύπους:
(1) . Πλάκα Α+φάσης: Καθυστερήστε το άμεσο φως κατά 1/4 λ και προσθέστε τα δύο σετ φωτεινών κυμάτων αφού συνδυάσετε τους άξονες. Το πλάτος αυξάνεται και η δομή του δείγματος γίνεται πιο φωτεινή από το περιβάλλον μέσο, σχηματίζοντας μια φωτεινή αντίθεση (ή αρνητική αντίθεση)
(2) . Πλάκα Β+φάσης: Καθυστέρησε το περιθλαμένο φως κατά 1/4 λ και αφαιρέστε τα κύματα φωτός αφού συνδυάσετε τους άξονες δύο σετ ακτίνων φωτός, με αποτέλεσμα τη μείωση του πλάτους και τη δημιουργία σκοτεινής αντίθεσης (ή θετικής αντίθεσης). Η δομή γίνεται πιο σκούρα από το περιβάλλον μέσο
