Μέθοδος Άμεσης Καταμέτρησης Μικροβιακών Μικροσκοπίων
Η χρήση ενός αιμοκυτταρόμετρου για την απευθείας μέτρηση μικροοργανισμών στο μικροσκόπιο είναι μια ευρέως χρησιμοποιούμενη μέθοδος για την καταμέτρηση των μικροβίων. Το πλεονέκτημα αυτής της μεθόδου είναι η διαισθητικότητά της και η ταχύτητά της. Τοποθετήστε το κατάλληλα αραιωμένο βακτηριακό εναιώρημα (ή εναιώρημα σπορίων) στον θάλαμο μέτρησης μεταξύ της αντικειμενοφόρου πλάκας του αιμοκυτταρομέτρου και της πλάκας καλύμματος και μετρήστε στο μικροσκόπιο. Λόγω του σταθερού όγκου του χώρου μέτρησης (0,1 mm2), ο συνολικός αριθμός μικροοργανισμών ανά μονάδα όγκου μπορεί να μετατραπεί με βάση τον αριθμό των μικροοργανισμών που παρατηρούνται στο μικροσκόπιο. Λόγω του γεγονότος ότι αυτή η μέθοδος υπολογίζει το άθροισμα ζωντανών και νεκρών βακτηριακών κυττάρων, είναι επίσης γνωστή ως μέθοδος ολικής μέτρησης βακτηρίων.
Μια πλάκα μέτρησης αιμοσφαιρίων είναι συνήθως μια ειδικά σχεδιασμένη γυάλινη πλάκα με τέσσερις αυλακώσεις που σχηματίζουν τρεις πλατφόρμες. Η μεσαία πλατφόρμα χωρίζεται στη μέση με μια μικρή οριζόντια αυλάκωση και κάθε πλευρά της πλατφόρμας είναι χαραγμένη με ένα πλέγμα. Κάθε πλέγμα χωρίζεται σε εννέα μεγάλα τετράγωνα και το μεγάλο τετράγωνο στη μέση είναι η αίθουσα μέτρησης, όπου πραγματοποιείται η μικροβιακή καταμέτρηση.
Υπάρχουν γενικά δύο προδιαγραφές για την κλίμακα της αίθουσας μέτρησης. Το ένα είναι ότι ένα μεγάλο τετράγωνο χωρίζεται σε 16 μεσαία τετράγωνα και κάθε μεσαίο τετράγωνο χωρίζεται περαιτέρω σε 25 μικρά τετράγωνα (Εικόνα VIII -2). Μια άλλη μέθοδος είναι να διαιρέσετε ένα μεγάλο τετράγωνο σε 25 μεσαία τετράγωνα και κάθε μεσαίο τετράγωνο χωρίζεται περαιτέρω σε 16 μικρά τετράγωνα (Εικόνα VIII -1, C). Αλλά ανεξάρτητα από το μέγεθος του πίνακα μέτρησης, ο αριθμός των μικρών τετραγώνων σε κάθε μεγάλο τετράγωνο είναι ο ίδιος, δηλαδή 16 × 25=400 μικρά τετράγωνα.
Εάν το μήκος της πλευράς κάθε μεγάλου τετραγώνου είναι 1mm, το εμβαδόν κάθε μεγάλου τετραγώνου είναι 1mm2. Μετά την κάλυψη με γυαλί κάλυψης, το ύψος μεταξύ της διαφάνειας και του γυαλιού καλύμματος είναι 0,1 mm, επομένως ο όγκος της αίθουσας μέτρησης είναι 0,1 mm3.
Κατά την μέτρηση, συνήθως μετράται ο συνολικός αριθμός βακτηρίων σε πέντε τετράγωνα και στη συνέχεια προκύπτει η μέση τιμή κάθε τετραγώνου. Ο πολλαπλασιασμός του με το 16 ή το 25 δίνει τον συνολικό αριθμό βακτηρίων σε ένα μεγάλο τετράγωνο, ο οποίος στη συνέχεια μετατρέπεται στον συνολικό αριθμό βακτηρίων σε 1 ml βακτηριακού διαλύματος.
