Εισαγωγή στα πλεονεκτήματα και τα μειονεκτήματα του μικροσκοπίου σάρωσης λέιζερ πολλαπλών φώτων
Πλεονεκτήματα της μικροσκοπίας σάρωσης με λέιζερ πολλαπλών φώτων:
1. Διεγερμένη από το κόκκινο φως ή το υπέρυθρο φως, η σκέδαση του φωτός είναι μικρή και η σκέδαση των μικρών σωματιδίων είναι αντιστρόφως ανάλογη με την τέταρτη δύναμη του μήκους κύματος.
2. Περισσότερα διάσπαρτα φωτόνια από το τμήμα απεικόνισης μπορούν να συλλεχθούν χωρίς τρύπες καρφίτσας.
3. Η οπή καρφίτσας δεν μπορεί να διακρίνει τα διάσπαρτα φωτόνια που εκπέμπονται από την περιοχή εκτός εστίασης ή την περιοχή εστίασης και η αναλογία σήματος προς θόρυβο της απεικόνισης πολλαπλών φωτονίων σε βαθιά στρώματα είναι καλή.
4. Το υπεριώδες ή ορατό φως που χρησιμοποιείται για τη διέγερση ενός φωτονίου απορροφάται εύκολα και εξασθενεί από το δείγμα πριν η δέσμη φτάσει στο εστιακό επίπεδο και δεν είναι εύκολο να διεγείρονται βαθιά στρώματα.
5. Όσον αφορά την παρατήρηση με βιολογικό μικροσκόπιο, η πρώτη σκέψη είναι να μην βλάψουμε την ενεργό κατάσταση του ίδιου του οργανισμού και να διατηρήσουμε την κυκλοφορία του νερού, τη συγκέντρωση ιόντων, το οξυγόνο και τα θρεπτικά συστατικά. Στην περίπτωση της παρατήρησης φωτός, τόσο η θερμότητα όσο και η ενέργεια των φωτονίων πρέπει να παραμένουν εντός της ποσότητας ακτινοβολίας και της φωτεινής ενέργειας που δεν θα βλάψει τα κύτταρα.
6. Η πολυφωτονική μικροσκοπία έχει πολλά πλεονεκτήματα. Όπως η τρισδιάστατη ανάλυση, η βαθιά διείσδυση, η αποτελεσματικότητα σκέδασης, το φως φόντου, η αναλογία σήματος προς θόρυβο, έλεγχος κ.λπ., όλα έχουν χαρακτηριστικά που δεν είχαν ή δεν μπορούσαν να ξεπεράσουν τα προηγούμενα μικροσκόπια λέιζερ.
Μειονεκτήματα της μικροσκοπίας σάρωσης με λέιζερ πολλαπλών φώτων:
1. Μόνο για απεικόνιση φθορισμού.
2. Εάν το δείγμα περιλαμβάνει χρωμοφόρα που απορροφούν το φως διέγερσης, το δείγμα μπορεί να υποστεί θερμική βλάβη.
3. Η ανάλυση είναι ελαφρώς μειωμένη. Αν και μπορεί να βελτιωθεί χρησιμοποιώντας το ομοεστιακό διάφραγμα ταυτόχρονα, το σήμα χάνεται.
4. Λόγω του περιορισμού των ακριβών υπερταχέων λέιζερ, το κόστος του μικροσκοπίου σάρωσης πολλαπλών φωτονίων είναι σχετικά υψηλό.
